PAR-1與人類肺癌轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.pdf

1、縮略詞表英文縮略詞表英文縮寫AmpBSACIAPDEPCDTTEBEcadherinE.coliEDTAFNG3PDHHDACHRPHSPkbkDLBLNMCSMOPSMMPMTTNCNDPKNF一火日NSCLCODOligo(dT)ORFPAGE英文全稱AmpicillinBovineserumalbuminCalfintestinalalkalineDiethylpyrocarbonateDithiothreitolEthidium

2、bromideEpitheliacadherinEscherichiaColiEthylenediaminetetraaceticacidFibronectinGlyceraldehyde3phosphatedehydrogenaseHistonedeacylaseHorseradishperoxidaseHeatshockproteinkilobasepairkilodaltonLuriabertanimediumLamininMul

3、tiplecloningsites3[NMorpholinolpropranesulfonicacidMatrixmetalloproteinaseThiazolylblueNitrocelluloseNucleosidediphosphatekinaseNuclearfactorxgenebindingNonsmallcelllungcanceropticaldensityOligodeoxythymidylicacidOpening

4、ReadingFramePolyacrylamidegelelectrophoresis中文名稱氨節(jié)青霉素牛血清白蛋白牛小腸堿性磷酸酶焦碳酸乙二醋二硫蘇糖醇漠化乙錠上皮型鈣粘素大腸桿菌乙二胺四乙酸纖粘連蛋白三磷酸甘油脫氫酶組蛋白脫酞酶辣根過氧化物酶熱休克蛋白千堿基對(duì)千道爾頓LB培養(yǎng)基層粘連蛋白多克隆位點(diǎn)3[N一嗎琳代卜丙磺酸基質(zhì)金屬蛋白酶唆哇藍(lán)硝酸纖維素二核普酸激酶K基因結(jié)合核因子非小細(xì)胞肺癌光密度寡聚脫氧胸腺et核普酸開放閱讀框聚丙烯

5、酸胺凝膠電泳摘要PAR1與人類肺癌轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究(摘要)確定調(diào)控人類腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)鍵基因?qū)Πl(fā)現(xiàn)腫瘤治療新策略具有重要意義。腫瘤轉(zhuǎn)移過程中存在多種調(diào)控因素，它們?cè)诓煌愋湍[瘤中發(fā)揮著不同的作用，有的在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用還存在爭(zhēng)議，也有一些調(diào)控因子被逐漸揭示在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮作用。PAR1是凝血酶的主要受體，是近來發(fā)現(xiàn)的可能與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因。雖然已對(duì)PARA與腫瘤轉(zhuǎn)移的相關(guān)性進(jìn)行了初步研究，但對(duì)其在腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移過程中的作用尚未闡明。對(duì)PA

6、R1功能的研究多數(shù)是以細(xì)胞系為模型的體外實(shí)驗(yàn)，對(duì)其在人體標(biāo)本中的實(shí)驗(yàn)研究卻很少，PAR1與人類肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究尚未見報(bào)告。我們首先以人體肺癌組織和細(xì)胞株為研究對(duì)象，通過體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)研究，探討PAR1在人類肺癌侵襲、轉(zhuǎn)移過程中的作用及調(diào)節(jié)的分子機(jī)制。用RTPCR及免疫組化方法觀察PAR1在人類肺癌組織中的表達(dá)。比較肺癌原發(fā)灶及部分轉(zhuǎn)移灶中PAR1的表達(dá)情況，結(jié)合臨床病理資料及形態(tài)學(xué)定量分析結(jié)果，探討PAR1表達(dá)與肺癌侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系

7、。結(jié)果顯示:轉(zhuǎn)移組與非轉(zhuǎn)移組、原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶、以及原發(fā)灶與肺組織之間的PAR1表達(dá)存在顯著差異而在腫瘤大小、組織學(xué)類型和組織學(xué)分化的各組之間差異無顯著意義。以上結(jié)果提示了PAR1過度表達(dá)與人類肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。RTPCRWesternblot方法檢測(cè)5個(gè)不同類型肺癌細(xì)胞株中PAR1的表達(dá)情況，結(jié)果顯示二PAR1mRNA和蛋白在肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞株P(guān)LA801D(高轉(zhuǎn)移潛能)、PLA801C(低轉(zhuǎn)移潛能)、肺腺癌細(xì)胞株Anip973(高

8、轉(zhuǎn)移潛能)、AGZY83a(低轉(zhuǎn)移潛能)以及肺小細(xì)胞癌細(xì)胞株NCI1446中均有不同水平的表達(dá)，但在PLA801C和PLA801D中的表達(dá)差異最明顯。將PAR1正義和反義真核表達(dá)載體分別轉(zhuǎn)染至PLA801C和PLA801D細(xì)胞中，篩出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株為模型。RTPCR和Westernblot及免疫組化檢測(cè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株中PAR1的表達(dá)變化，結(jié)果顯示:轉(zhuǎn)染正義和反義PAR1分別明顯上調(diào)和下調(diào)了PLA801C和PLA801D的PARImRN