豬源腸道與呼吸道細(xì)菌的分離鑒定.pdf

1、豬腸道與呼吸道微生物菌群不僅對(duì)宿主的生理、健康有著重要作用，同時(shí)也是重要微生物資源的來源，因此對(duì)豬腸道與呼吸道細(xì)菌的分離鑒定就顯得尤為重要，本研究利用16S rRNA序列分析方法對(duì)豬源腸道與呼吸道細(xì)菌進(jìn)行了鑒定。
　　根據(jù)細(xì)菌的生長(zhǎng)特性和形態(tài)學(xué)觀察，從豬腸道糞便樣品中共分離到126株細(xì)菌。設(shè)計(jì)細(xì)菌16S rRNA基因通用引物對(duì)其中的11株細(xì)菌進(jìn)行了PCR和16S rRNA序測(cè)定，并對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行BLAST比對(duì)分析。結(jié)果表明：11株

2、細(xì)菌包括2株檸檬明串珠菌、1株鼠乳桿菌、1株唾液乳酸桿菌、1株類腸膜魏斯氏菌、2株融合魏斯氏菌、2株洛菲氏不動(dòng)桿菌和2株糞腸球菌。對(duì)這些細(xì)菌的生長(zhǎng)特征和菌體特征進(jìn)行系統(tǒng)的鑒定和分析。11株細(xì)菌中，檸檬明串珠菌、鼠乳桿菌和唾液乳酸桿菌是腸道益生菌，糞腸球菌和洛菲氏不動(dòng)桿菌是條件致病菌，類腸膜魏斯氏菌和融合魏斯氏菌是在豬體發(fā)現(xiàn)的新型細(xì)菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，洛菲氏不動(dòng)桿菌M8對(duì)阿莫西林、磺胺嘧啶、頭孢類等多種抗生素敏感，但對(duì)環(huán)丙沙星耐藥；而糞

3、腸球菌M11對(duì)利福平、利奈唑胺、萬古霉素敏感，對(duì)阿莫西林、紅霉素、環(huán)丙沙星等其他多種抗生素耐藥。
　　通過細(xì)菌的生長(zhǎng)特性和形態(tài)學(xué)觀察，從176份有肺炎癥狀豬的肺臟病料組織中分離出82株細(xì)菌。設(shè)計(jì)細(xì)菌16S rRNA基因通用引物對(duì)其中25株細(xì)菌進(jìn)行了PCR和序列測(cè)定，并對(duì)測(cè)定序列進(jìn)行了BLAST比對(duì)分析。結(jié)果表明：25株細(xì)菌中包括1株糞腸球菌；2株卡他莫拉氏菌；3株豬鏈球菌；2株短桿菌；6株動(dòng)性桿菌；1株嗜冷桿菌；1株綠色氣球菌；1

4、株產(chǎn)低溫脂肪酶菌；3株芽孢桿菌和5株紅斑丹毒絲菌。對(duì)這些細(xì)菌的菌落生長(zhǎng)特征和菌體特征進(jìn)行了系統(tǒng)鑒定和分析。25株細(xì)菌中，芽孢桿菌是益生菌，糞腸球菌、卡他莫拉氏菌和綠色氣球菌是條件性致病菌，豬鏈球菌和紅斑丹毒絲菌是致病菌，而短桿菌、動(dòng)性桿菌、嗜冷桿菌和產(chǎn)低溫脂肪酶菌都是在豬體發(fā)現(xiàn)的新型細(xì)菌。紅斑丹毒絲菌ER4和卡他莫拉氏菌 S7的生長(zhǎng)曲線結(jié)果符合細(xì)菌生長(zhǎng)規(guī)律，紅斑丹毒絲菌 ER4在菌液濃度為1.89×109時(shí)生長(zhǎng)速度達(dá)到最大，而卡他莫拉是

5、菌S7在菌液濃度為2.329×1010時(shí)生長(zhǎng)速度達(dá)到最大。小鼠致病性試驗(yàn)結(jié)果表明，紅斑丹毒絲菌具有較強(qiáng)的毒力。
　　本研究經(jīng)16SrRNA基因序列分析方法鑒定的36株細(xì)菌，其中，檸檬明串珠菌、鼠乳桿菌、唾液乳酸桿菌和芽孢桿菌是腸道益生菌，糞腸球菌、洛菲氏不動(dòng)桿菌、卡他莫拉氏菌、綠色氣球菌是條件致病菌，豬鏈球菌和紅斑丹毒絲菌是致病菌，類腸膜魏斯氏菌、融合魏斯氏菌、短桿菌、動(dòng)性桿菌、嗜冷桿菌和產(chǎn)低溫脂肪酶菌都是在豬體發(fā)現(xiàn)的新型細(xì)菌。本