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1、目的:觀察突觸囊泡蛋白2A(synaptic vesicle protein2A,SV2A)在難治性顳葉癲癇患者腦組織中的表達,探討其在難治性癲癇中的作用。 資料和方法:試驗組33例均為臨床確診的難治性癲癇患者,發(fā)作類型符合1981年國際抗癲癇聯(lián)盟(ILAE)有關(guān)癲癇發(fā)作分類的標(biāo)準(zhǔn)。其中男17例,女16例,年齡15~58歲,平均28.24±10.44(X±s)歲;病程2~40年,平均14.36±8.88(X±s)年;發(fā)作類型中部
2、分性繼發(fā)全身強直性、陣攣性或強直-陣攣性發(fā)作14例,復(fù)雜部分性發(fā)作14例,有多種發(fā)作類型(部分性、強直性、強直-陣攣性發(fā)作)5例。對照組共有9例,全部為腦外傷后手術(shù)中獲得。其中男4例,女5例,年齡14~51歲,平均34.56±12.55(X±s)歲。將手術(shù)切除取得的腦組織部分標(biāo)本立即放于液氮(-196℃)中冷凍保存以備作western blot,其他標(biāo)本置于4%多聚甲醛中固定48小時(4℃),石臘包埋切片,常溫保存?zhèn)溆谩2捎妹庖呓M織化學(xué)
3、,免疫熒光和western blot方法檢測腦組織標(biāo)本中SV2A的表達水平,計算機圖象分析系統(tǒng)測量平均光密度值(AOD),所測光密度值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示,t檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析,以p<0.05作為有顯著性差異。 結(jié)果: 1、免疫組化:SV2A主要在神經(jīng)元的胞膜表達,神經(jīng)膠質(zhì)細胞和內(nèi)皮細胞未見表達,陰性對照無陽性表達。難治性癲癇組的AOD值為0.1651±0.0564(X±s),對照組為0.2347±0.0187(
4、X±s),兩組間比較有顯著差異(t=2.9473,p=0.0065)。 2、免疫熒光:共聚焦顯示SV2A在神經(jīng)元表達,與對照組相比,SV2A蛋白在難治性癲癇組的表達較弱。 3、western blot:定量分析顯示難治性癲癇組的SV2A蛋白表達量顯著低于對照組。 結(jié)論: 1、熒光雙標(biāo)證實SV2A主要在神經(jīng)元的胞膜表達,蛋白定量證實SV2A在難治性癲癇組的表達量顯著低于對照組。 2、SV2A蛋白在難
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