AFM球形針尖的制作及癌細(xì)胞力學(xué)特性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、癌癥，近幾十年來已對人類健康構(gòu)成強(qiáng)大威脅，雖然對于腫瘤的組織病理學(xué)診斷和放化療技術(shù)日趨成熟，但癌癥的發(fā)病機(jī)理和轉(zhuǎn)移機(jī)制等根本性問題卻尚未明晰。利用AFM在單細(xì)胞水平對癌細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)分析已成為當(dāng)今癌癥研究的最新熱點(diǎn)，具有其它技術(shù)無法比擬的優(yōu)勢，但大多集中于AFM形貌成像等基礎(chǔ)研究，從機(jī)械角度出發(fā)對于癌細(xì)胞的力學(xué)特性進(jìn)行分析限于研究手段等原因卻受到較少關(guān)注，而力學(xué)特性與癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程息息相關(guān)。本課題正是利用自行制作的小球探針，基于AFM的N

2、anoindentation功能在液態(tài)環(huán)境下對癌細(xì)胞的力學(xué)特性進(jìn)行測定，分析其對轉(zhuǎn)移的影響。
　　首先，對現(xiàn)有的應(yīng)用于固體納米壓的痕三角形懸臂探針針尖進(jìn)行功能化改造，擴(kuò)展了AFM在生物領(lǐng)域的應(yīng)用。利用實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有設(shè)備，自行制作出滿足液態(tài)下對活細(xì)胞進(jìn)行納米壓痕的小球探針，并利用Cleveland方法對其彈性常數(shù)進(jìn)行了校準(zhǔn)。該制作過程同樣適用于其它微米級球狀物向微米級尖狀物的粘附。
　　然后，分析了液態(tài)環(huán)境下實(shí)施活細(xì)胞納米壓痕實(shí)驗(yàn)

3、所涉及的各方面條件，包括活細(xì)胞的選擇、培養(yǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)，液態(tài)實(shí)驗(yàn)環(huán)境建立，儀器的改裝，實(shí)驗(yàn)的改進(jìn)，操作的優(yōu)化，以及具體實(shí)驗(yàn)前儀器的標(biāo)定等等，每一項(xiàng)都關(guān)乎實(shí)驗(yàn)?zāi)芊耥樌M(jìn)行。其中自行總結(jié)的液態(tài)下壓痕目標(biāo)細(xì)胞快速定位方法具有很好的實(shí)用性和通用性。
　　最后，在保持細(xì)胞最佳生理活性的液態(tài)環(huán)境下，對轉(zhuǎn)移性不同的Anip-973和AGZY-83a兩種肺癌細(xì)胞進(jìn)行AFM納米壓痕實(shí)驗(yàn)，并利用Hertz接觸方程及應(yīng)力松弛模型對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行非線性擬合，再通