肝癌細(xì)胞流變特性的初步研究.pdf

1、重慶大學(xué)博士學(xué)位論文肝癌細(xì)胞流變特性的初步研究姓名：吳澤志申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：蔡紹皙2000.9.1重鏖奎堂壁主蘭垡堡苧一——的粘彈性系數(shù)主要反映了張力整合的細(xì)胞骨架的整體抗拉特性，細(xì)胞微絲結(jié)構(gòu)對(duì)于決定細(xì)胞粘彈特性具有重要的作用。在細(xì)胞骨架干擾劑作用下，肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞粘彈特性效應(yīng)方式或強(qiáng)度的差異可能反應(yīng)了兩種細(xì)胞細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和機(jī)能狀態(tài)或者兩種細(xì)胞對(duì)細(xì)胞骨架干擾劑處理敏感性的差異。在一較大劑量范圍的VBL作用下

2、，肝癌細(xì)胞粘彈性系數(shù)基本上呈單調(diào)劑量依賴性下降，這可能反應(yīng)了該類藥物用于臨床化療時(shí)對(duì)癌細(xì)胞的細(xì)胞流變學(xué)效應(yīng)。(2)采用分步裱襯的方法制備IV型膠原／層粘連蛋白(LN)／纖維連結(jié)蛋白(FN)裱襯表面，定量研究了肝癌細(xì)胞和肝細(xì)胞在上述ECM成分裱襯表硅的粘附力學(xué)特性。定義細(xì)胞粘附力為細(xì)胞同相應(yīng)裱襯表面粘附分離的臨界負(fù)壓值與微吸管橫截面積的乘積，以該粘附力作為細(xì)胞粘附性的定量指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞在IV型膠原單一裱襯表面的粘附力表現(xiàn)出對(duì)IV型膠

3、原裱襯濃度較好的依賴性。當(dāng)Iv型膠原裱村濃度從lg／m1增加至5pg／ml時(shí)，肝癌細(xì)胞粘附力增加幅度(202x10。o牛頓，26％)遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于肝細(xì)胞粘附力增加幅度(156610。10牛頓，742％)，并呈現(xiàn)飽和效應(yīng)，IV型膠原裱襯濃度超過2Itg／ml時(shí)，肝癌細(xì)胞粘附力不再增加。LN與IV型膠原復(fù)合裱襯并不一定導(dǎo)致肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞在IV型膠原裱襯表面的粘附力增加。在特定的復(fù)合裱襯濃度(0625Itg／ml或125肛g／m1)，LN使肝細(xì)胞

4、或肝癌細(xì)胞在IV型膠原裱襯表面的粘附力達(dá)到最大值，其余濃度的LN與IV型膠原復(fù)合裱襯均引起細(xì)胞粘附力的下降。在所研究的濃度范圍(卜20懈／m1)內(nèi)及現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)條件下，F(xiàn)N與IV型膠原復(fù)合裱襯并不引起肝癌細(xì)胞在IV型膠原裱襯表面的粘附力發(fā)生明顯的變化。上述結(jié)果提示肝癌細(xì)胞與IV型膠原的粘附特性較之肝細(xì)胞發(fā)生了明顯的變化。LN是調(diào)節(jié)肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞與IV型膠原粘附特性的重要因素。(3)用四種人工合成肽精～甘一天冬一絲(RGDS)、甘一精一甘一

5、天冬～蘇～脯(GRGDTP)、酪一異亮一甘一絲～精(YIGSR)和半胱一天冬一脯一甘一酪一異亮一甘一絲一精(CDPGYIGSR)研究了肝癌細(xì)胞在IV型膠原／層粘連蛋白／纖維連結(jié)蛋白裱襯表面的粘附性對(duì)兩種粘附識(shí)別序列RGD和YIGSR的依賴性。為了歸納和整理實(shí)驗(yàn)結(jié)果，根據(jù)競(jìng)爭(zhēng)性抑制的原理，采用一簡(jiǎn)單的函數(shù)F=b／(7a)叼擬合細(xì)胞平均粘附力F與競(jìng)爭(zhēng)抑制性肽濃度I的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肝癌細(xì)胞在IV型膠原裱襯表面的粘附性為RGD依賴性而非Y