肝癌細胞中STAT3的功能初步研究.pdf

1、肝癌是我國高發(fā)性惡性腫瘤，分布廣，轉(zhuǎn)移率高，其發(fā)生的分子機制尚不是很明確。目前，從信號傳導(dǎo)途徑來研究與治療癌癥已成為癌癥治療的新興領(lǐng)域。細胞因子通過與細胞上的特異性受體相結(jié)合，激發(fā)一系列的信號傳導(dǎo)途徑，并引起下游相關(guān)基因的表達，從而影響細胞乃至組織的生物學(xué)功能效應(yīng)?，F(xiàn)有研究揭示，許多癌癥的發(fā)生與細胞內(nèi)相關(guān)信號途徑的異常激活或者失活相關(guān)。 STAT(Signaltransducerandactivatoroftranscripti

2、on)是存在于細胞質(zhì)中的一類潛在的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子。作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子，這類蛋白在細胞信號傳遞中起著承上啟下的作用，在細胞的生長、存活、增殖和分化中起著非常重要的作用。研究表明，STAT3的持續(xù)激活與許多腫瘤和癌癥相關(guān)，如黑色素瘤、骨髓瘤、急慢性白血病、頭頸癌、乳腺癌、前列腺癌、小細胞癌等。 本文選取了信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子STAT3為研究對象，研究了肝癌細胞BEL-7402中STAT3的異?；罨捌鋵毎w移的作

3、用，并研究了肝癌細胞HepG2中STAT3途徑與WNT信號途徑中β-Catenin的相互關(guān)系以及嘗試用STAT3RNA干擾方法研究STAT3的功能，試圖在細胞水平上研究尋找治療肝癌的方法。 1.成功構(gòu)建了綠色熒光蛋白(GFP)標記的STAT3野生型(WT)/突變體(CYF)融合質(zhì)粒，將其轉(zhuǎn)入細胞，以熒光素酶報告系統(tǒng)驗證了融合蛋白的活性；通過測定綠色熒光為標記的細胞遷移距離的方法證實，過表達野生型STAT3對肝癌細胞系BEL-74

4、02細胞遷移有促進作用，而突變體STAT3能夠降低癌細胞的遷移。 2.利用細胞的免疫組化雙色染色和蛋白免疫沉淀的方法證實STAT3與β-catenin可以形成復(fù)合物，隨著細胞密度的增加，STAT3與野生型β-catenin形成的復(fù)合物含量減少。但利用熒光素酶活性分析方法發(fā)現(xiàn)STAT3對β-catenin轉(zhuǎn)錄激活活性沒有明顯的影響。實驗表明，STAT3信號途徑與β-catenin信號途徑之間很有可能存在著一定的內(nèi)在聯(lián)系。