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文檔簡介
1、目的:研究人類長鏈非編碼RNA母系印記基因3(MEG3)在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用,并探討其分子機制。方法:通過高通量測序比較肝癌組織和癌旁組織非編碼RNA的表達變化,篩選出若干肝癌相關(guān)長鏈非編碼RNA基因(long noncoding RNAs,lncRNAs)。構(gòu)建出這些lncRNAs的真核表達載體,并篩選出高表達的穩(wěn)定細胞株株,運用qRT-PCR、Western Blots、RNA-pulldown和表達譜芯片等技術(shù)探索MEG3的
2、相互作用蛋白及作用機理。結(jié)果:qRT-PCR方法在多組肝癌組織及其癌旁組織中檢測若干個lncRNAs的表達,結(jié)果顯示多數(shù)肝癌組織中多個lncRNA異常表達,其中MEG3表達顯著下調(diào)。成功構(gòu)建了若干個lncRNAs的真核表達質(zhì)粒,篩選獲得了穩(wěn)定高表達MEG3基因的SK-Hep-1肝癌細胞株,表達譜芯片結(jié)果經(jīng)生物信息學(xué)分析得到若干可能與MEG3發(fā)揮抑制細胞增殖有影響的基因。結(jié)論:MEG3在多數(shù)肝癌組織中表達下調(diào),MEG3能顯著地抑制細胞增殖
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