長非編碼RNA Rian-Irm在骨骼肌發(fā)育中的功能初步研究.pdf

1、Rian是一個(gè)母源表達(dá)的長非編碼RNA（long non-coding RNA, lncRNA），位于小鼠12號染色體，包括Irm，Meg8和AB063319三個(gè)長轉(zhuǎn)錄本。大量研究數(shù)據(jù)顯示，其參與多種生物學(xué)過程的調(diào)控。前期研究發(fā)現(xiàn)，作為Rian的主要轉(zhuǎn)錄本，Irm在骨骼肌發(fā)育的重要時(shí)期高表達(dá)并且在骨骼肌整個(gè)發(fā)育過程中呈上升趨勢，然而在骨骼肌發(fā)育成熟后其表達(dá)水平較低，這與許多骨骼肌發(fā)育的調(diào)控基因的時(shí)空表達(dá)特點(diǎn)相一致，提示Irm在骨骼肌發(fā)育

2、過程中Irm在具有特殊作用。
　　本研究以小鼠肌源性細(xì)胞系C2C12和小鼠原代骨骼肌細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，首先檢測了Irm在體外骨骼肌細(xì)胞增殖分化過程中的表達(dá)規(guī)律；其次通過改變內(nèi)源Irm的表達(dá)水平，研究其對骨骼肌細(xì)胞增殖、遷移和分化等生物學(xué)過程的影響；最后采用全基因組表達(dá)譜芯片測序的方法篩選骨骼肌發(fā)育相關(guān)的差異基因，探討了Irm對骨骼肌細(xì)胞增殖分化可能的作用機(jī)制。
　　形態(tài)學(xué)觀察及結(jié)果分析表明，過表達(dá)Irm可以導(dǎo)致骨骼肌細(xì)胞增殖和

3、遷移能力的下降，但是在一定程度上促進(jìn)了骨骼肌細(xì)胞的終末端分化，同時(shí)使肌調(diào)節(jié)因子MyoD和Myogenin的表達(dá)上調(diào)；而干擾Irm則在一定程度上促進(jìn)了細(xì)胞增殖和遷移，但是會明顯抑制骨骼肌細(xì)胞的分化能力，并且使肌調(diào)節(jié)因子MyoD和Myogenin的表達(dá)顯著下調(diào)。通過芯片數(shù)據(jù)分析及qRT-PCR驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)Irm表達(dá)水平的改變會影響p38 MAPK信號通路上下游基因的表達(dá)。
　　綜上所述，Irm既可以對骨骼肌細(xì)胞的增殖和遷移能力產(chǎn)生一定負(fù)