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1、J I l l ] 1 1 1 ] I l l I I I l l s I J I I I I I ] 1 1 】1Y 3 3 3 1 2 2 4 ;分類(lèi)號(hào):U D C :密級(jí):學(xué)號(hào):4 0 6 5 2 0 4 1 2 3 6 5南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文長(zhǎng)鏈非編碼R N A P C A T - 1 在肝癌侵襲轉(zhuǎn)移中的機(jī)制研究T h eS t u d y o f L o n g N o n - —c o d i n g R N A P
2、C A T —- 1I n v o l v i n gi nM e t a s t a s i so f H e p a t o c e l l u l a rC a r c i n o m a張德元培養(yǎng)單位( 院、系) ·:, 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱(chēng):一劉繁榮教授主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門(mén)類(lèi): 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)學(xué)科專(zhuān)業(yè)名稱(chēng): 病理與病理生理學(xué)論文答辯日期: 2 0 1 7 年5 月答辯委員會(huì)主席:評(píng)閱人:2 0 1 7
3、 年5 月 釜摘要摘要目的:為了探索長(zhǎng)鏈非編碼R N A ( I n c R N A ) 前列腺癌相關(guān)性轉(zhuǎn)錄本1 ( P C A T - 1 ) 在肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制,我們檢測(cè)了P C A T - 1 在肝癌組織及細(xì)胞株中的表達(dá)差異,并探討其與肝癌臨床分期,病理分級(jí)之間的關(guān)系。檢測(cè)P C A T - 1 沉默對(duì)肝癌細(xì)胞侵襲遷移能力的影響。通過(guò)構(gòu)建P C A T - 1 和H M G B l 熒光素酶載體,探索P C A T - 1是否能
4、夠作為競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源性R N A ( c e R N A ) 抑制m i R 一1 2 9 —5 p 的功能,從而提高m i R 一1 2 9 。5 p 的靶基因H M G B l 的表達(dá)。而這種I n c R N A —m i R N A —m R N A 提高了我們對(duì)肝癌侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制的認(rèn)識(shí),P C A T - 1 .m i R .1 2 9 —5 p —H M G B l 通路也將為肝癌的診斷及治療提供了新的思路。方法:收集2 0 1
5、2 .0 8 —2 0 1 6 .0 4 期間在南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院肝膽外科行肝部分切除術(shù)( 術(shù)前未放療或化療) ,術(shù)后確診為肝細(xì)胞肝癌患者的肝癌組織和相應(yīng)的癌旁正常肝臟組織,整理患者的臨床病理資料。選用T r i z o l 法提取總R N A ,定量后逆轉(zhuǎn)錄成c D N A ,利用實(shí)時(shí)熒光定量P C R ( Q u a n t i t a t i v e r e a l —t i m eP C R ,q P C R )檢測(cè)肝癌組織、
6、癌旁組織及肝癌細(xì)胞株中的P C A T - 1 的表達(dá),并結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析。在體外實(shí)驗(yàn)中,①構(gòu)建s i R N A 載體,研究P C A T - 1 沉默對(duì)肝癌細(xì)胞株H e p G 2 和L M 3 遷移及侵襲能力影響。劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移,t r a n s w e l l 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲。②結(jié)合生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)m i R c o d e ,U C S C ,T a r g e t S c a n 提供的信息,構(gòu)建P C
7、 A T - 1 和H M G B l 的熒光質(zhì)粒,運(yùn)用熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測(cè)P C A T - 1 .m i R - 1 2 9 —5 p 和H M G B l .m i R - 1 2 9 .5 p 的關(guān)系。③研究P C A T - 1 沉默對(duì)m i R - 1 2 9 —5 p 表達(dá)的影響,研究P C A T - 1 沉默對(duì)H M G B l 的表達(dá)的影響。免疫組化及W e s t e r n b l o t 檢測(cè)H M G B l
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