肝癌細胞系中腫瘤干細胞樣細胞的初步研究.pdf_第1頁
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1、福建醫(yī)科大學碩士學位論文肝癌細胞系中腫瘤干細胞樣細胞的初步研究姓名：魏植強申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：鄭秋紅20100301ABSTRACTObjectives：Hepatocellularcarcinoma(HCC)isoneofthemostcommonsolidmalignaniesinChinaIt’Spossiblethathepatocellularcarcinomacontainscancerstemcells

2、responsibleforitsmalignancyThepurposesofthisstudyare(1)toisolateandidentifycancerstem—likecellsfromthePLC／PRF5cellline(2)tostudytherelationshipbetweenABCG2andtumorigenicability(3)toinvestigatethedifferentiallyexpressedmi

3、RNAinPLC／PRF5cellline，whichareusefulforfurtherstudiesonspecificfunctionsofmiRNAinpathogenesisofHCCMethods：(1)TheexpressionofABCG2inthePLC／PRF5celllinewasexaminedbyflowcytometryABCG2wereisolatedfromthePLC／PRF5celllineusin

4、gmagneticactivatedcellsorting(MACS)methodThepuritywasanalyzedbyflowcytometryTheproliferationandtheabilityofcolonyforminginsoftagarofABCG2andABCG2。cellswereobservedABCG2andABCG2‘populationswereinoculatedintotheaxillaryfos

5、saofNOD／SCIDmicesattheinjectiondose5x103、1x104、5x104、5x105respectivelyThemiceweremonitoredforpalpabletumorformationandweresacrificedafter6weekstoassesstumorformationrate(2)MicroRNAmicroarraywasusedtoinvestigatethediffere

6、ntiallyexpressedmiRNAsinthePLC／PRF一5celllineABCG2cellsandABCG2‘cellstotalRNAswereextractedbymirVanaRNAIsolationKitHybridizationsweremadebyapplyingthecellmiRNAstomammalianmiRNAschipDataanalysiswasproceededbyAgilentScanCon

7、trolsoftwareversionA70andAgilentFeatureExtraction(腳softwareversion95Results：FlowcytometrywasusedtotesttheexpressionofABCG2inthePLC／PRF5celllineThepurityofABCG2cellsinthePLC／PRF5celllineWas5581710％TheABCG2cellswereisolate

8、dexaminedbyflowcytometryItspurityismorethan80％CellgrowthcurveindicatedthatproliferativecapacityoftheABCG2cellswasbetterthantheABCG2。cellsClonyformationassaywascarriedoutin6wellPlatePlatesweremaintainedat37“Cinhumidifiedi

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