乳腺癌細胞系中腫瘤干細胞相關亞群體外實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、1.乳腺癌細胞系中腫瘤干細胞相關亞群初步研究。 目的:檢測不同乳腺癌細胞系中腫瘤干細胞相關亞群含量,并探討使乳腺癌細胞系MCF-7中腫瘤干細胞相關亞群富集的方法。 方法:利用流式細胞儀檢測三種乳腺癌細胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435s中SP細胞(side population cell)比例及CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例。用Percoll不連續(xù)密度梯度法分離MCF-7細胞亞群

2、,通過流式細胞儀篩選出SP細胞富集的亞群;用添加生長因子的無血清培養(yǎng)液來培養(yǎng)MCF-7,不同時間點檢測CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例。 結果: MCF-7、MDA-MB-435s中SP細胞比例分別為3.61%和2.72%,MDA-MB-231中未檢測到SP細胞。三種乳腺癌細胞系中CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例分別為0.87%、0.59%和94.04%。MCF-7經Percoll分選得到五個亞群

3、,各亞群在SP細胞含量、細胞周期、生長曲線及克隆形成率等方面均存在異質性,D亞群SP細胞富集,比例高達25.23%;MCF-7在無血清培養(yǎng)液中,腫瘤干細胞呈懸浮的干細胞球樣生長,CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例隨著無血清培養(yǎng)時間的增加而增加,三周時達29.35%。 結論: SP檢測與CD44<'+>CD24<'-/low>細胞檢測是目前乳腺癌干細胞檢測的兩種常用方法,但兩者用于同一種乳腺癌細胞系中的檢測結果并不一

4、致,均有一定的局限性。乳腺癌細胞系MCF-7具有異質性特征,通過Percoll分選或無血清培養(yǎng)均能使MCF-7中腫瘤干細胞相關亞群(SP細胞或CD44<'+>CD24<'-/low>細胞)富集。 目的:探討雌二醇(E<,2>)及拮抗劑三苯氧胺(TAM)對ER陽性乳腺癌細胞系MCF-7中腫瘤干細胞相關亞群(CD44<'+>CD24<'-/low>細胞)的影響。 方法: E<,2>組設10<'-7>、10<'-8>及10<

5、'-9>mol/L三個濃度,E<,2>+TAM組再加入10<'-6>mol/L TAM,對照組加等量藥物溶劑(乙醇),培養(yǎng)10天和20天時分別用流式細胞儀檢測各組中CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例。 結果:培養(yǎng)10天時,三個不同濃度E2組中CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例分別為(2.28±0.38)%、(6.35±0.5 7)%和(2.86±0.29)%,與對照組中(0.83±0.03)%相比比例

6、均增高(P<0.05)。E2+TAM組中CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例分別為(1.85±0.19)%、(4.11±0.41)%和(1.73±0.33)%,與相同濃度E<,2>組中相比比例均下降(P<0.05)。培養(yǎng)20天時,E<,2>組中CD44<'+>CD24<'-/low>細胞比例分別為(2.41±0.25)%、(6.18±0.41)%和(2.47±0.15)%,E<,2>+TAM組中比例分別為(1.93±0.21

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