DHA對乳腺癌細胞系的化療增敏性研究.pdf

1、目的：本實驗通過觀察DHA與5-FU聯(lián)合作用對乳腺癌細胞系MDA-MB-231增殖與凋亡的影響，研究DHA對細胞Wnt/β-catenin信號傳導(dǎo)通路的作用，探討DHA抑制乳腺癌的可能分子機制，為臨床上應(yīng)用此藥物輔助治療乳腺癌提供實驗依據(jù)。
　　方法：以MDA-MB-231細胞系為研究對象，采用MTT法測定不同濃度DHA（10、20、30、40、50μg/ml）對MDA-MB-231細胞增殖的影響，5-FU（50μg/ml）單用及

2、與不同濃度DHA（20、40μg/ml）合用對MDA-MB-231細胞的毒性作用；流式細胞技術(shù)檢測細胞周期和凋亡；RT-PCR從 mRNA水平檢測 DHA對MDA-MB-231細胞β-catenin、GSK-3β基因表達的影響；Western blot從蛋白水平分析DHA對MDA-MB-231細胞β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β（Ser9）蛋白表達的影響；免疫細胞化學(xué)法觀察DHA單獨及與GSK-3β抑制劑（LiCl，2

3、0 mmol/l）聯(lián)合作用對細胞中β-catenin蛋白定位的影響。
　　結(jié)果：一定濃度的DHA（10、20、30、40、50μg/ml）對乳腺癌MDA-MB-231細胞的生長有明顯的抑制作用，而且隨著作用時間的延長抑制率增加（p<0.05）。20μg/ml、40μg/ml的DHA分別與5-FU聯(lián)合作用后對MDA-MB-231細胞的增殖抑制率較5-FU單藥組增加（p<0.05），隨著聯(lián)合作用時間的延長抑制率增加（p<0.05）。D

4、HA（20μg/ml）、5-FU單獨作用MDA-MB-231細胞48h后，細胞周期阻滯于G0/G1期（63.71±0.82％、73.36±0.71%），誘導(dǎo)細胞凋亡（4.66±0.44%、6.99±0.10%），聯(lián)合用藥時對G0/G1期阻滯作用更明顯（77.08±0.71%），細胞凋亡率增加（8.22±.0.15%）（p<0.05）。DHA作用于MDA-MB-231細胞48h后，β-catenin基因及蛋白表達下調(diào)（p<0.05），對G