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2、導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進行了審定。本論文由本人獨立撰寫,文責(zé)自負。研究生簽名:璐攤章:季孢列廬至月泌日中文摘要TGF131誘導(dǎo)乳腺癌細胞向腫瘤干細胞轉(zhuǎn)化的EMT機制研究以及化療對干細胞相關(guān)指標(biāo)的影響中文摘要第一部分:TGFpl誘導(dǎo)乳腺癌細胞向腫瘤干細胞轉(zhuǎn)化的EMT機制研究目的:通過TGF131誘導(dǎo)乳腺癌細胞發(fā)生的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epit
3、helialmesenchymaltransition,EMT),研究EMT能否使腫瘤干細胞相關(guān)標(biāo)志物的表達發(fā)生變化,并討論其意義。方法:將人乳腺癌細胞株MCF7置于37℃,飽和濕度5%C02,含10%胎牛血清I沖Ⅶ1640培養(yǎng)基中進行常規(guī)培養(yǎng),待細胞進入對數(shù)生長期后用于實驗。實驗分兩組,實驗組MCF7細胞培養(yǎng)時加入TGFp1,使其濃度達到lOng/ml,對照組加入等量PBS液。1TGFDl誘導(dǎo)培養(yǎng)MCF7細胞發(fā)生EMT的形態(tài)學(xué)觀察:將
4、TGFp1作用于MCF7細胞株,在倒置相差顯微鏡下定時觀察細胞的形態(tài)變化。2細胞增殖實驗(MTT法)檢測TGFp1對細胞增殖的影響。3應(yīng)用24孔Transwell侵襲小室進行MCF7細胞的侵襲試驗,檢測TGFB1對MCF7細胞株侵襲能力的影響。應(yīng)用細胞劃痕實驗檢測TGFDl對MCF7細胞株遷移能力的影響。4RTPCR檢測TGFp1處理72h后細胞中干細胞相關(guān)標(biāo)記物Oct4基因和EMT相關(guān)標(biāo)記物Ecadherin基因、Ncadherin基
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