川芎嗪、苦參堿抑制白血病細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：以HL-60細(xì)胞和Jurkat細(xì)胞為研究對(duì)象，觀察低、中、高濃度川芎嗪和苦參堿對(duì)白血病細(xì)胞粘附、運(yùn)動(dòng)和侵襲以及基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的影響，初步探討川芎嗪和苦參堿抑制白血病細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)HL-60細(xì)胞和Jurkat細(xì)胞，通過MTT法篩選最佳藥物濃度，經(jīng)低、中、高濃度(0.05g/L、0.1g/L、0.15g/L)川芎嗪處理Jurkat細(xì)胞，經(jīng)低、中、高濃度(0.1g/L、0.15g/L、0.2g/L)

2、苦參堿處理HL-60細(xì)胞和Jurkat細(xì)胞，通過細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)和腫瘤細(xì)胞體外侵襲實(shí)驗(yàn)，觀察低、中、高濃度川芎嗪和苦參堿對(duì)白血病細(xì)胞粘附能力、運(yùn)動(dòng)能力和侵襲能力的影響，并采用RT-PCR檢測(cè)HL-60細(xì)胞和Jurkat細(xì)胞MMP-2和/或MMP-9mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：1.低、中、高濃度川芎嗪作用48h，Jurkat細(xì)胞存活率分別為(90.1±1.1)％、(82.8±1.8)％、(74.3±2.2)％；低、中、高濃度

3、苦參堿作用48h，HL-60細(xì)胞存活率分別為(88.2±0.9)％、(81.6±1.4)％、(74.9±2.1)％；Jurkat細(xì)胞存活率分別為(87.4±2.1)％、(81.0±1.2)％、(73.4±1.2)％；2.低、中、高濃度川芎嗪作用1h Jurkat細(xì)胞的粘附率分別為(86.8±0.4)％、(79.2±1.9)％、(71.7±2.2)％；作用8h Jurkat細(xì)胞的遷移率分別為(87.5±0.5)％、(75.1±0.8)％、

4、(61.9±1.2)％；作用48h Jurkat細(xì)胞的侵襲率分別為(81.4±2.2)％(66.0±3.6)％、(50.0±5.3)％；3.低、中、高濃度苦參堿作用1h HL-60細(xì)胞的粘附率分別為(85.8+0.5)％、(73.5±2.0)％、(61.9+1.3)％；作用8h HL-60細(xì)胞的遷移率分別為(82.9±1.1)％、(70.9±0.6)％、(60.1±2.5)％；作用48h HL-60細(xì)胞的侵襲率分別為(80.2±2.3)

5、％、(63.9±3.2)％、(48.8±2.2)％；4.低、中、高濃度苦參堿作用1h Jurkat細(xì)胞的粘附率分別為(88.1±0.6)％、(79.9±1.2)％、(70.0±1.6)％；作用8h Jurkat細(xì)胞的遷移率分別為(88.3±1.0)％、(74.7±2.2)％、(6 1.9±2.2)％；作用48h Jurkat細(xì)胞的侵襲率分別為(84.8±1.7)％、(70.4±2.2)％、(53.4±4.1)％；6.MMP-9在Jurk

6、at細(xì)胞中明顯表達(dá)，MMP-2則表達(dá)不明顯；MMP-2和MMP-9在HL-60細(xì)胞中均明顯表達(dá)；7.Jurkat細(xì)胞的侵襲能力與MMP-9 mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)；HL-60細(xì)胞的侵襲能力與MMP-2和MMP-9 mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)。 結(jié)論：⑴川芎嗪和苦參堿均能抑制HL-60細(xì)胞和/或Jurkat細(xì)胞的增殖，其抑制作用呈劑量和時(shí)間依賴性；0.05g/L、0.1g/L、0.15g/L川芎嗪和0.1g/L、0.15g/L、0.2

7、g/L苦參堿是本實(shí)驗(yàn)的最佳藥物濃度；⑵0.05g/L、0.1g/L和0.15g/L川芎嗪可以抑制Jurkat細(xì)胞的粘附能力、運(yùn)動(dòng)能力和侵襲能力，其抑制作用呈劑量依賴性；⑶0.1g/L、0.15g/L和0.2g/L苦參堿可以抑制HL-60細(xì)胞的粘附能力、運(yùn)動(dòng)能力和侵襲能力，其抑制作用呈劑量依賴性；⑷0.1g/L、0.15g/L和0.2g/L苦參堿可以抑制Jurkat細(xì)胞的粘附能力、運(yùn)動(dòng)能力和侵襲能力，其抑制作用呈劑量依賴性；⑸0.05g/

8、L、0.1g/L和0.15g/L川芎嗪可以下調(diào)Jurkat細(xì)胞MMP-9 mRNA的表達(dá)，其作用呈劑量依賴性；0.1g/L、0.15g/L和0.2g/L苦參堿可以下調(diào)HL-60細(xì)胞MMP-2和MMP-9 mRNA的表達(dá)，可以下調(diào)Jurkat細(xì)胞MMP-9 mRNA的表達(dá)，對(duì)MMP-9 mRNA表達(dá)的抑制作用呈劑量依賴性；⑹Jurkat細(xì)胞高表達(dá)MMP-9，不表達(dá)MMP-2；HL-60細(xì)胞高表達(dá)MMP-2和MMP-9；⑺川芎嗪和苦參堿抑制