甘草酸二銨對(duì)小鼠急性肝衰竭發(fā)生過程中HMGB1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討甘草酸二銨對(duì)小鼠急性肝衰竭發(fā)生過程中小鼠肝組織高遷移率族蛋白 B1（HMGB1）、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)、核轉(zhuǎn)錄因子（NF-KB）的表達(dá)的影響，以及與甘草酸二銨療效間的關(guān)系。
　　方法：取雄性昆明種小鼠96只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、急性肝功能衰竭組及甘草酸二銨治療組。模型組及治療組予D-Galn500mg/Kg及LPS10ug/Kg腹腔注射建立急性肝功能衰竭小鼠模型，并于建模1小時(shí)后予以甘草酸二銨70mg/Kg

2、對(duì)治療組小鼠進(jìn)行灌胃處理，正常對(duì)照組及模型組予等量生理鹽水灌胃，記錄小鼠死亡時(shí)間。以建模后4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)分別建立檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)，評(píng)估小鼠生命體征，取靜脈血以常規(guī)生化方法監(jiān)測(cè)小鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素（TBIL）含量，HE染色法檢查肝組織病理學(xué)改變，采用免疫組織化學(xué)法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)小鼠肝細(xì)胞中HMGB1、RAGE、NF-KBp65的蛋白表達(dá)量及mRNA水平。
　　結(jié)果：治療

3、組小鼠生存時(shí)間較模型組延長(zhǎng)(P<0.05)，模型組及治療組小鼠血清ALT和AST含量均顯著高于相應(yīng)正常對(duì)照(P<0.01)，且模型4小時(shí)、8小時(shí)組小鼠血清ALT和AST含量均高于及相應(yīng)治療組(P<0.05)，急性肝衰竭模型8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)組及甘草酸二銨治療12小時(shí)、24小時(shí)組小鼠血清 TBIL含量均顯著高于相應(yīng)正常對(duì)照(P<0.05)。病理組織學(xué)觀察正常組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)完整，模型組肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細(xì)胞灶狀壞死及大片壞死，炎細(xì)

4、胞浸潤(rùn)，治療組與模型組相比炎細(xì)胞浸潤(rùn)較輕。免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn)，模型8h、12h、24h組及治療8h、12h、24h組組小鼠肝組織中HMGB1、RAGE、NF-κBp65蛋白表達(dá)水平較相應(yīng)正常對(duì)照組顯著增加（P<0.01），且隨肝衰竭發(fā)展明顯增加,模型8小時(shí)、12小時(shí)組HMGB1、RAGE、NF-κBp65蛋白表達(dá)量高于較相應(yīng)甘草酸二銨治療組(P<0.05)。Real time-PCR結(jié)果顯示，模型組及治療8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)組小鼠肝

5、組織HMGB1mRNA、NF-κBp65mRNA表達(dá)量高于相應(yīng)正常對(duì)照組（P<0.05），模型8小時(shí)、12小時(shí)組HMGB1mRNA、NF-κBp65mRNA表達(dá)量高于較相應(yīng)治療組(P<0.05)。模型8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)組及治療8小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)組小鼠肝組織RAGEmRNA表達(dá)量顯著高于相應(yīng)正常對(duì)照組（P<0.05），且隨肝衰竭發(fā)展升高，模型8小時(shí)、12小時(shí)組RAGEmRNA表達(dá)量高于相應(yīng)治療組(P<0.05)。