異甘草酸鎂對(duì)急性肝衰竭小鼠FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　探討異甘草酸鎂對(duì)急性肝衰竭小鼠 FGL2凝血酶原酶和血小板活化因子表達(dá)及微血栓形成的影響，進(jìn)一步探討異甘草酸鎂的保肝機(jī)制，為異甘草酸鎂的臨床應(yīng)用提供新的理論依據(jù)。
　　方法
　　1、清潔級(jí)常規(guī)喂養(yǎng)健康雄性KM小鼠50只，飼養(yǎng)1周后隨機(jī)分為三組，分別為正常對(duì)照組，肝衰模型組，異甘草酸鎂組，其中異甘草酸鎂組又分為25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg劑量三個(gè)亞組，對(duì)照組和模型組各10只，異甘草酸鎂組三

2、個(gè)亞組各10只。
　　2、模型組和異甘草酸鎂組按350mg/kg D-Galn聯(lián)合30μg/kg LPS一次性注射進(jìn)腹腔內(nèi)誘導(dǎo)肝衰竭模型，造模前3天異甘草酸鎂組三個(gè)亞組分別腹腔注射25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg異甘草酸鎂注射液，每天一次，對(duì)照組和模型組分別注射等體積生理鹽水。于造模8h后處死各組小鼠。
　　3、各組分別進(jìn)行以下指標(biāo)檢測(cè)：1）常規(guī)病理切片、HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察各組肝組織病理改變和微血栓情

3、況。2）全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)丙氨酸基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、血清天冬氨酸轉(zhuǎn)移酶（ALT）、總膽紅素（TBil）的水平。3） Elisa法檢測(cè)血清中血小板活化因子（PAF）的水平。4）免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)FGL2凝血酶原酶的表達(dá)。5）RT-PCR法檢測(cè)FGL2mRNA的表達(dá)。
　　4、應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行各組數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析。
　　結(jié)果：
　　1、正常對(duì)照組，模型組，異甘草酸鎂組各亞組的

4、肝組織病理改變有明顯差異性，其中正常對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)完整，肝索排列條理清晰，肝細(xì)胞未見明顯變性和壞死。模型組肝正常組織結(jié)構(gòu)消失，鏡下可見大片細(xì)胞壞死，殘余少許正常肝細(xì)胞，很多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)于壞死區(qū)和匯管區(qū)，肝竇部充血、微血栓形成明顯，符合急性肝衰竭病理改變，結(jié)合小鼠臨床表現(xiàn)和肝功生化指標(biāo)結(jié)果提示誘導(dǎo)肝衰竭成功，異甘草酸鎂組可見部分肝細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死和微血栓形成，細(xì)胞腫脹明顯，嚴(yán)重程度和干預(yù)藥物濃度呈負(fù)相關(guān)。
　　2、正常對(duì)照組血清中A

5、LT、AST、TBiL基本正常，模型組血清ALT、AST含量最高，異甘草酸鎂組各亞組血清中ALT、ALT和對(duì)照組比較均有不同程度升高，和干預(yù)藥物濃度呈負(fù)相關(guān)，但比模型組低。TBiL各組間未見明顯差異性，可能和黃疸滯后性有關(guān)。
　　3、正常對(duì)照組血清PAF濃度最低，模型組血清PAF濃度最高，異甘草酸鎂組隨著藥物濃度的增加，血清PAF濃度逐漸下降，但各亞組濃度均高于對(duì)照組，低于模型組。
　　4、正常對(duì)照組肝血竇及微血管內(nèi)皮細(xì)胞基

6、本沒有或少許FGL2凝血酶原酶表達(dá)，模型組可見FGL2凝血酶原酶棕黃色深染色表達(dá)，尤其集中在肝血竇和微血管附近內(nèi)皮細(xì)胞高度表達(dá)，異甘草酸鎂組隨著劑量的增加，F(xiàn)GL2的表達(dá)逐漸減少，各亞組蛋白含量表達(dá)均高于對(duì)照組，低于模型組。
　　5、正常對(duì)照組FGL2mRNA表達(dá)量很少，模型組高表達(dá)，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，異甘草酸鎂組各亞組均檢測(cè)到FGL2mRNA表達(dá)，與藥物濃度呈負(fù)相關(guān)性，與模型組以及各亞組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。