重型乙型肝炎恢復(fù)期患者肝組織FGL2凝血酶原酶表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　通過觀察重型乙型肝炎恢復(fù)期患者肝組織中 FGL2凝血酶原酶（Fibrinogen-like protein2 prothrombinase）及HBVDNA的表達(dá)，并分析其FGL2凝血酶原酶的表達(dá)與患者肝臟病理變化、肝功能、凝血酶原活動(dòng)度（PTA）、肝組織HBVDNA及血清HBVDNA的相關(guān)性，探討FGL2凝血酶原酶在重型乙型肝炎發(fā)病機(jī)制及進(jìn)展過程中的作用，進(jìn)而了解FGL2凝血酶原酶表達(dá)測定的臨床意義。
　　方法：

2、
　　（1）根據(jù)重型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)《2012年版肝衰竭診治指南》和慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)《2015年版慢性乙型肝炎防治指南》，收集乙型肝炎患者57例，其中重型乙型肝炎恢復(fù)期患者38例為研究組（根據(jù)患者肝組織病理結(jié)果將無肝硬化的分為研究1組，有肝硬化為研究2組）；慢性乙型肝炎患者19例為對(duì)照組（根據(jù)患者肝組織病理結(jié)果將輕度分為對(duì)照1組，中重度為對(duì)照2組）。
　?。?）通過B超定位行肝臟穿刺活檢術(shù)獲取肝組織。行肝組織病理切片，HE染

3、色，后做FGL2免疫組化制片。觀察采集到的FGL2陽性表達(dá)強(qiáng)弱，即以細(xì)胞漿顯現(xiàn)黃色、棕黃色、棕褐色染色為標(biāo)準(zhǔn)，選擇每張切片上有代表性的高倍視野區(qū)域（×200），再以染色程度和陽性細(xì)胞面積來判斷結(jié)果。
　　（3）將石蠟切片的肝組織通過鹽析法提取HBVDNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測肝組織HBVDNA和血清HBVDNA的表達(dá)。
　?。?）檢測肝功能：主要為血清總膽紅素（TBiL）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移

4、酶（AST）的表達(dá)水平；檢測凝血酶原活動(dòng)度（PTA）的表達(dá)情況。
　?。?）應(yīng)用SPSS17.0軟件，對(duì)研究組與對(duì)照組，研究組之間分別進(jìn)行兩兩對(duì)比統(tǒng)計(jì)分析肝組織中FGL2及HBVDNA的表達(dá)差異，并分析研究組FGL2的表達(dá)與患者肝臟病理變化、肝功能、PTA、肝組織HBVDNA及血清HBVDNA的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　（1）研究組（重型乙型肝炎恢復(fù)期）肝組織相當(dāng)于炎癥分級(jí)（G）及纖維化分期（S）的病理特點(diǎn)為：無肝硬化

5、的重型乙型肝炎恢復(fù)期組（研究1組）30例，G12例（6.67％），G22例（6.67%），G311例（36.66%），G415例（50%）， S17例（23.33%），S23例（10%），S35例（16.67%），S415例（50%）。有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組（研究2組）8例：G23例（37.5%），G33例（37.5%）， G42例（25%）。提示重型乙型肝炎恢復(fù)期肝組織相當(dāng)于以G3-4S3-4為主，存在壞死后明顯的肝纖維化，或

6、存在壞死后的肝硬化，且肝組織炎癥及纖維化同時(shí)表現(xiàn)。對(duì)照組（慢性乙型肝炎）經(jīng)病理診斷為輕度10例（對(duì)照1組）；中重度9例（對(duì)照2組）。
　?。?）各組肝組織中FGL2表達(dá)的情況為：研究1組有29例（96.67%）陽性表達(dá)和1例（3.33%）陰性表達(dá)，其中陽性表達(dá)分別為：9例（30%）弱陽性，5例（16.67%）中度陽性，15例（50%）強(qiáng)陽性。研究2組和慢性中重度乙型肝炎組（對(duì)照2組）均有中強(qiáng)陽性表達(dá)。研究2組陽性表達(dá)分別為1例（1

7、2.5%）中度陽性，7例（87.5%）強(qiáng)陽性。對(duì)照2組陽性表達(dá)分別為5例（55.56%）中度陽性，4例（44.44%）強(qiáng)陽性。慢性輕度乙型肝炎組（對(duì)照1組）為陰性至弱陽性表達(dá)，其中有7例（70%）弱陽性表達(dá)和3例（30%）陰性表達(dá)。
　?。?）肝組織中FGL2表達(dá)的平均分值情況為：研究組7.47±4.18，對(duì)照組4.11±4.51，經(jīng)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.007，P＜0.01）。即研究組FGL2表達(dá)的平均分值高于對(duì)照組，說

8、明重型乙型肝炎恢復(fù)期組肝組織中FGL2的表達(dá)強(qiáng)于慢性乙型肝炎組，提示重型乙型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞炎癥壞死程度高于慢性乙型肝炎。
　?。?）各組肝組織中FGL2表達(dá)的平均分值分別為：6.47±4.03（研究1組），11.25±2.12（研究2組），0.80±0.63（對(duì)照1組），7.78±4.06（對(duì)照2組）。經(jīng)檢驗(yàn)F=18.065，組間比較，P＜0.01，提示FGL2的表達(dá)在四組中存在顯著差異。
　　1）研究1組與研究2組比較，

9、其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001，P＜0.01）。即研究1組的平均分值低于研究2組，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組肝組織中FGL2表達(dá)弱于有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組。提示無肝硬化的重型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞炎癥壞死程度低于有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期。
　　2）研究1組與對(duì)照1組比較，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。即研究1組的平均分值高于對(duì)照1組，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組肝組織中FGL2表達(dá)強(qiáng)于慢性輕度乙型肝炎

10、組。提示無肝硬化的重型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞炎癥壞死程度高于慢性輕度乙型肝炎。
　　3）研究1組與對(duì)照2組比較，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.191，P＞0.05）。即研究1組的平均分值與對(duì)照2組相仿，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組肝組織中FGL2表達(dá)與慢性中重度乙型肝炎組相似。提示無肝硬化的重型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞炎癥壞死程度與慢性中重度乙型肝炎相似。
　　4）研究2組與對(duì)照1組比較，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。即研究2組

11、的平均分值高于對(duì)照1組，說明有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組肝組織中FGL2表達(dá)強(qiáng)于慢性輕度乙型肝炎組。提示有肝硬化的重型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞炎癥壞死程度高于慢性輕度乙型肝炎。
　　5）研究2組與對(duì)照2組比較，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.021，P＜0.05）。即研究2組的平均分值高于對(duì)照2組，說明有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組肝組織中FGL2表達(dá)強(qiáng)于慢性中重度乙型肝炎組。提示有肝硬化的重型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞炎癥壞死程度高于慢性中重度乙型

12、肝炎。
　　（5）肝組織中 HBVDNA表達(dá)的平均值(lg copies/ml)情況為：研究組3.95±1.18，對(duì)照組4.79±1.49，經(jīng)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.041，P＜0.05）。即研究組平均值低于對(duì)照組，說明重型乙型肝炎恢復(fù)期肝組織中HBVDNA的表達(dá)低于慢性乙型肝炎，提示重型乙型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞HBV復(fù)制程度低于慢性乙型肝炎。
　?。?）肝組織中HBVDNA表達(dá)的各組平均值(lg copies/ml)情況

13、分別為：3.89±1.21（研究1組），4.18±1.07（研究2組），4.70±1.84（對(duì)照1組），4.88±1.08（對(duì)照2組）。研究1組分別與研究2組、對(duì)照1組、對(duì)照2組進(jìn)行兩兩比較，研究2組分別與對(duì)照1組、對(duì)照2組進(jìn)行兩兩比較，僅研究1組與對(duì)照2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.038，P＜0.05）。即研究1組表達(dá)的平均值低于對(duì)照2組，說明無肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期組HBVDNA表達(dá)低于慢性中重度乙型肝炎組。提示無肝硬化的重

14、型乙型肝炎恢復(fù)期肝細(xì)胞HBV復(fù)制程度低于慢性中重度乙型肝炎。其他組間比較經(jīng)檢驗(yàn)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　?。?）重型乙型肝炎恢復(fù)期肝組織中FGL2表達(dá)的平均分值與其恢復(fù)期的TBiL、ALT、AST、PTA、肝組織HBVDNA、血HBVDNA行Spearman相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　重型乙型肝炎恢復(fù)期肝組織相當(dāng)于以G3-4S3-4為主，存在壞死后明顯的肝纖維化，且肝組

15、織炎癥及纖維化同時(shí)表現(xiàn)，存在壞死后的肝硬化。肝組織中FGL2的表達(dá)重型乙型肝炎恢復(fù)期高于慢性乙型肝炎，其中無肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期低于有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期，且與慢性中重度乙型肝炎相似；有肝硬化的重型乙型肝炎恢復(fù)期高于慢性中重度乙型肝炎；重型乙型肝炎恢復(fù)期高于慢性輕度乙型肝炎，說明肝組織中FGL2凝血酶原酶的表達(dá)并非為重型肝炎所特有的現(xiàn)象，F(xiàn)GL2在重型乙型肝炎恢復(fù)期為強(qiáng)表達(dá)，與病情存在壞死后的肝硬化正相關(guān)，且會(huì)隨著重型乙型肝