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1、目的:借助立體定位術(shù)和熒光來界定GFP裸小鼠的腦解剖結(jié)構(gòu)。
方法:對(duì)GFP裸小鼠腦分別進(jìn)行冠狀位、矢狀位和水平位的冰凍切片,經(jīng)熒光成像后行尼氏染色做對(duì)比觀察,結(jié)合Paxinos編著的小鼠腦圖譜對(duì)熒光圖像內(nèi)的解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行辨認(rèn)分析。通過立體定位儀定位10只成年GFP裸小鼠的前囟和人字點(diǎn)所在的腦冠狀切面,然后進(jìn)行冰凍切片,比較小鼠個(gè)體間以及與小鼠腦圖譜間的解剖結(jié)構(gòu)差異。利用小鼠腦切片模具分別對(duì)10個(gè)離體鼠腦進(jìn)行冠狀位和矢狀位上的
2、切片,再進(jìn)行冰凍切片,熒光鏡下觀察,比較個(gè)體間差異,并對(duì)離體鼠腦結(jié)構(gòu)進(jìn)行定位。
結(jié)果:GFP鼠腦的不同結(jié)構(gòu)間存在著熒光色差,借此可辨認(rèn)出鼠腦的解剖結(jié)構(gòu):細(xì)胞核、尼氏小體密集區(qū)及神經(jīng)纖維分布區(qū)為弱熒光信號(hào),細(xì)胞核、尼氏小體密集區(qū)周圍結(jié)構(gòu),如嗅球的叢狀層、小腦的分子層為強(qiáng)熒光信號(hào)。切片經(jīng)尼氏染色后,熒光強(qiáng)度明顯減弱,體視顯微鏡下觀察到的腦結(jié)構(gòu)與熒光鏡觀察的結(jié)果基本一致,參照小鼠腦圖譜可對(duì)熒光圖像上的解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行辨認(rèn)。對(duì)在體鼠腦
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