表達(dá)綠色熒光蛋白的裸小鼠培育與膠質(zhì)瘤干細(xì)胞移植實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：培育表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的裸小鼠，并探討將其用于人膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(HGSCs)移植實(shí)驗(yàn)研究。 方法：將C57BL/6J-GFP轉(zhuǎn)基因小鼠與NC系裸小鼠進(jìn)行交配，在繼代時(shí)嚴(yán)格挑選都表達(dá)GFP的無毛雄鼠(♂)與有毛母鼠(♀)交配，通過肉眼、免疫組織化學(xué)和熒光顯微鏡等方法觀察GFP在裸小鼠皮膚和臟器中的表達(dá)情況，繼將HGSCs原位移植于表達(dá)GFP的裸小鼠，以觀察移植瘤的生長(zhǎng)情況。 結(jié)果：傳至8代的裸小鼠，包括腦在內(nèi)的

2、全身主要器官和細(xì)胞都表達(dá)GFP。對(duì)用于HGSCs原位移植的腦，能清哳辨認(rèn)出不發(fā)光的瘤細(xì)胞和發(fā)光的宿主細(xì)胞。而瘤細(xì)胞經(jīng)人特異白細(xì)胞抗體(HLA)連接紅色熒光劑(PE)的免疫組織化學(xué)染色后，在共聚焦顯微鏡下可清晰顯示與宿主腦細(xì)胞的組織學(xué)關(guān)系。 結(jié)論：用免疫功能健全、表達(dá)GFP的轉(zhuǎn)基因鼠與免疫功能缺陷的裸小鼠雜交，可獲得腦等組織器官表達(dá)GFP的裸小鼠。對(duì)其進(jìn)行HGSCs原位移植，因可清晰辨認(rèn)移植瘤與宿主組織的關(guān)系而有望用于腫瘤組織重構(gòu)