FGFR4基因多態(tài)性與原發(fā)性肝細(xì)胞癌的遺傳易感性研究.pdf

1、背景和目的：原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我國(guó)最常見的惡性腫瘤之一,我國(guó)每年新發(fā)病例約占全球45％,已成為世界上肝癌發(fā)病最為集中的國(guó)家。肝癌具有起病隱匿,侵襲性生長(zhǎng)快速,治療后易復(fù)發(fā),病死率高等特點(diǎn),始終是我國(guó)醫(yī)學(xué)界面臨的基礎(chǔ)和臨床研究的重大課題。我國(guó)醫(yī)學(xué)工作者在肝癌的外科手術(shù)治療上取得了舉世矚目的成就。但傳統(tǒng)的外科手術(shù)加化療或放療等方法都有其局限性,肝癌的生物治療尚不成熟,肝癌根治性切除后

2、的復(fù)發(fā)率很高,復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素主要與肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移性有關(guān)。因此,要提高肝癌患者的生存率應(yīng)加強(qiáng)肝癌分子病理機(jī)制的研究,尋找肝癌相關(guān)基因,探討肝癌生物治療的新途徑。 目前研究認(rèn)為,癌基因和/或抑癌基因改變是決定癌癥發(fā)生的重要因素,而基因多態(tài)性可能與不同個(gè)體對(duì)癌癥易感性及預(yù)后多樣性有關(guān)。成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4(fibroblast growth factor receptor 4,FGFR4)在不同組織中均有較高表達(dá)。在乳腺癌,FGF

3、R4基因第388位密碼子第一個(gè)堿基的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNPs)與乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌及軟組織癌預(yù)后等密切相關(guān)；而FGFR4基因多態(tài)性與原發(fā)性肝細(xì)胞癌預(yù)后的關(guān)系尚未見研究報(bào)道。 本研究旨在運(yùn)用Taqman基因分型技術(shù)對(duì)FGFR4基因在中國(guó)華東人群中的不同分型作初步的關(guān)聯(lián)研究,并探討其在肝癌個(gè)性化治療方面潛在的應(yīng)用價(jià)值。 方法： 1.收集東方肝膽醫(yī)院經(jīng)

4、臨床/病理證實(shí)的中國(guó)漢族原發(fā)性肝癌的全血； 2.對(duì)所收集的病例組進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、病例資料統(tǒng)計(jì)以及后期隨訪,其中包括生活習(xí)慣,合并肝炎類型,合并其它疾病,腫瘤類型,病理類型,治療方法,預(yù)后,復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移等； 3.對(duì)所收集的病例組酚/氯仿法提取全血基因組DNA并標(biāo)化統(tǒng)一濃度； 4.以病例組肝炎年齡、性別比例為參照,配對(duì)收集健康體檢樣本并純化全血基因組DNA,統(tǒng)一標(biāo)化,其中對(duì)照組設(shè)為兩組,分別為健康人群(以HBsAg陰

5、性為準(zhǔn))以及HBV攜帶者(以HBsAg陽(yáng)性為準(zhǔn))但未合并肝硬化、肝癌； 5.對(duì)所收集的對(duì)照組進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查及資料統(tǒng)計(jì)； 6.根據(jù)已有NCBI等報(bào)道SNPs位點(diǎn)和小樣本測(cè)序結(jié)果選擇位點(diǎn),設(shè)計(jì)TaqMan熒光探針(美國(guó)ABI公司),對(duì)FGFR4的4個(gè)位點(diǎn)(rs351855,rs641101,rs376618,rs31777)在所有樣本及對(duì)照中進(jìn)行基因分型； 7.根據(jù)每個(gè)侯選位點(diǎn)的具體情況,建立可用于大樣本基因分型的

6、方法,分析侯選基因調(diào)控區(qū)功能多態(tài)性位點(diǎn)基因型在病例與對(duì)照組的頻率分布差異,并根據(jù)HBV感染等環(huán)境暴露進(jìn)行分層分析,運(yùn)用非條件Logistic回歸分析,檢測(cè)和探討侯選基因的多態(tài)位點(diǎn)是否影響腫瘤的易感性及可能存在的基因-基因和基因-環(huán)境因素間的相互作用,確定相關(guān)腫瘤的易感基因和相應(yīng)的調(diào)控區(qū)易感多態(tài)位點(diǎn)。 結(jié)果： 1.與已有報(bào)道不同,中國(guó)人群中僅rs351855(Arg388)和rs641101兩個(gè)位點(diǎn)有不同分型結(jié)果,而rs3

7、76618,rs31777兩個(gè)位點(diǎn)在中國(guó)人群中均為單一分型； 2.兩個(gè)有分型結(jié)果位點(diǎn)均與原發(fā)性肝癌的發(fā)病無相關(guān)性； 3.rs351855 C/T基因型與HCC合并大體門靜脈癌栓存在負(fù)相關(guān)； 4.rs351855 T/T基因型與HCC合并肝硬化存在負(fù)相關(guān)； 結(jié)論： 我們成功運(yùn)用了Taqman基因分型技術(shù),對(duì)肝癌相關(guān)FGFR4基因的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行基因分型,分析其位點(diǎn)與肝癌的發(fā)生是否存在相關(guān)性。