燒傷大鼠腸粘膜細胞凋亡變化及重組人生長激素調(diào)控作用的研究.pdf

1、目的： 本研究在以往我們對嚴重燒傷后早期應用重組人生長激素（rhGH）實驗及臨床研究的基礎上，仍采用能夠引起腸道損傷及腸源性感染的燒傷后免疫抑制大鼠模型，模擬臨床嚴重燒傷后患者處于免疫功能低下時所發(fā)生的病理生理變化，以觀察嚴重燒傷大鼠腸粘膜細胞凋亡的變化規(guī)律；早期應用rhGH對嚴重燒傷大鼠腸粘膜細胞凋亡的作用，探討其作用機制以及聯(lián)合應用rhGH和美羅培南對燒傷后大鼠腸源性感染及預后的作用。 方法： 成年健康雄性W

2、istar大鼠共計172只，隨機分為對照組、燒傷組、rhGH組（簡稱GH組）、美羅培南組和rhGH+美羅培南組，后四組造成25％總體表面積（TBSA）Ⅲ度燒傷創(chuàng)面，立即腹腔注射地塞米松80mg/kg，腹部皮下注射等滲鹽水（NS）50mL/kg抗休克。GH組于傷后2h開始皮下注射rhGH[長春金賽藥業(yè)有限公司，1.33IU/（kg·d）]；美羅培南組于傷后2h開始左臀肌肌肉注射美羅培南（日本住友制藥株式會社）20mg/kg；GH+美羅培南

3、組二者聯(lián)用；燒傷組在相應部位注射等量NS連續(xù)3d共4次。 （1）成年健康雄性Wistar大鼠36只，隨機分為對照組（6只）和燒傷組（30只），于傷后6h、12h、1d、3d、5d，通過流式細胞儀、HE染色和原位末端標記法（TUNEL法）、腸粘膜細胞Caspase-3酶活性測定檢測嚴重燒傷大鼠腸粘膜細胞凋亡的變化規(guī)律。 （2）成年健康雄性Wistar大鼠42只，對照組（6只）、燒傷組（18只）和rhGH組（簡稱GH組，18只）

4、，于傷后12h、1d、3d，通過HE染色、TUNEL法和腸粘膜細胞Caspase-3酶活性測定檢測嚴重燒傷大鼠早期應用rhGH對腸粘膜細胞凋亡的影響。 （3）成年雄性Wistar大鼠94只，隨機分為對照組（6只）、燒傷組（22只）、GH組（22只）、美羅培南組（22只）和GH+美羅培南組（22只），于傷后3d、7d和10d，通過腸系膜淋巴結（MLN）細菌學檢查、HE染色法和7d大鼠體重變化和10d生存率檢測，觀察聯(lián)合應用rhGH和

5、美羅培南對嚴重燒傷大鼠腸源性感染和預后的影響。 結果： （1）流式細胞儀檢測、HE染色、TUNEL法和腸粘膜細胞Caspase-3酶活性檢測顯示：大鼠燒傷后腸粘膜上皮細胞凋亡數(shù)較對照組升高，于1d達到高峰，以后逐漸下降，但均明顯高于對照組（P<0.01）。 （2）燒傷組腸粘膜形態(tài)結構及上皮細胞損傷嚴重，GH組明顯減輕，基本接近對照組。在傷后各時相點，燒傷組及GH組腸粘膜上皮細胞凋亡率均較對照組顯著增加（P<0.01）

6、，但GH組顯著低于燒傷組（P<0.01），兩組均于傷后24h達高峰（15.40％±3.21％vs38.80％±6.98％）；燒傷組及GH組Caspase-3酶活性亦明顯高于對照組（P<0.05），GH組明顯低于燒傷組（P<0.05），亦于傷后24h達高峰（156.13±4.66U/mgvs214.60±9.29U/mg）。 （3）聯(lián)合應用rhGH和美羅培南組MLN未檢出細菌，未發(fā)現(xiàn)臟器膿腫，體重下降明顯輕于其他組（P<0.05），