膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型建立及其滑膜IL-33的表達(dá).pdf

1、目的：優(yōu)化造模條件，建立可重復(fù)的高發(fā)病率膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠模型，并探討膠原給藥劑量以及性別因素對(duì)造模成功率的影響。檢測(cè)IL-33在CIA大鼠以及正常大鼠滑膜中的表達(dá)情況并進(jìn)行比較。 方法：以雞II型膠原蛋白(CII)與弗氏不完全佐劑(IFA)制成乳劑，皮內(nèi)注射近交系Wistar大鼠誘導(dǎo)CIA。采用隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，考察400μg、300μg、200μg、Opg4個(gè)膠原蛋白給藥劑量水平，以及性別因素對(duì)發(fā)病率的影響，并每周測(cè)

2、量足爪容積，進(jìn)行關(guān)節(jié)炎評(píng)分，每?jī)芍蹺LISA檢測(cè)血清抗CII抗體、TNF-α濃度至初次免疫后第6周，進(jìn)行X線(xiàn)攝片并處死大鼠行病理HE染色，以檢查關(guān)節(jié)病變與骨質(zhì)破壞情況。選取造模成功的CIA大鼠，以半定量RT-PCR與免疫組化染色方法測(cè)定其關(guān)節(jié)滑膜IL-33的mRNA以及蛋白表達(dá)情況，并與正常對(duì)照組做比較。 結(jié)果：發(fā)病大鼠可見(jiàn)體重下降、足掌增厚、踝關(guān)節(jié)腫脹，并有數(shù)量不等的跖、趾關(guān)節(jié)紅腫，且行走不便，急性期受累足不能負(fù)重。平均臨床評(píng)

3、分達(dá)6.3±1.8，其血清抗CII抗體與TNF-α濃度均升高，初次免疫后第6周時(shí)X線(xiàn)及病理形態(tài)呈現(xiàn)慢性滑膜炎表現(xiàn)，可見(jiàn)明顯骨質(zhì)侵蝕。統(tǒng)計(jì)分析顯示發(fā)病率隨膠原給藥劑量增加而上升，400μg組造模成功率達(dá)100％。性別對(duì)造模成功率無(wú)顯著影響。各種CII劑量在造模過(guò)程中均未發(fā)生動(dòng)物死亡。CIA大鼠關(guān)節(jié)滑膜IL-33 mRNA水平與蛋白表達(dá)水平均較正常對(duì)照組增高。免疫組化染色顯示CIA大鼠滑膜中IL-33的主要來(lái)源有血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及

4、滑膜襯里細(xì)胞，在正常對(duì)照組大鼠滑膜的上述細(xì)胞中也可見(jiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，但較病變滑膜淺染。 結(jié)論： 1.成功建立發(fā)病穩(wěn)定的大鼠模型，其臨床表現(xiàn)顯著，免疫學(xué)及病理學(xué)上具有典型不可逆慢性滑膜炎癥特征，并顯示出明顯的骨質(zhì)侵蝕。 2.提高膠原蛋白給藥劑量能夠提高造模成功率，400μg的劑量發(fā)病率可達(dá)100％。性別對(duì)發(fā)病率無(wú)明顯影響。 3.IL-33在關(guān)節(jié)滑膜的內(nèi)皮細(xì)胞、滑膜襯里細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞中呈組成性低表達(dá)。