TERT、CLPTM1L基因多態(tài)性與男性肺癌易感性的研究.pdf

1、隨著人類平均壽命延長，惡性腫瘤對人類健康的威脅日益突出，已成為危害人類健康的常見病和多發(fā)病，其發(fā)病率和死亡率均位于各類疾病的前列。自上世紀(jì)80年代起，肺癌已成為全球范圍內(nèi)發(fā)病率最高的惡性腫瘤，其發(fā)病率已居男性腫瘤的首位。近年來，女性肺癌的發(fā)病率也明顯增加。目前，包括中國在內(nèi)的許多國家，肺癌的發(fā)病率和死亡率都居惡性腫瘤的首位。流行病學(xué)研究表明，肺癌的發(fā)生是環(huán)境因素和遺傳因素共同作用的結(jié)果，盡管80％以上的肺癌可歸咎于煙草暴露，但在相同的煙

2、草暴露下，僅不到20％的吸煙者發(fā)展為肺癌，提示不同個(gè)體對肺癌存在遺傳易感性。隨著國際人類基因組計(jì)劃(human genome project，HGP)的測序和單核苷酸多態(tài)（single nucleotide polymorphism，SNP）的單體型圖譜構(gòu)建工作的完成，尋找影響腫瘤遺傳易感性的SNP已經(jīng)成為目前的研究熱點(diǎn)。近年來，全基因組關(guān)聯(lián)研究(genome wide association study, GWAS)陸續(xù)展開，大量分析

3、了基因上各個(gè)位點(diǎn)與肺癌的關(guān)系，研究發(fā)現(xiàn)人類染色體5p15.33區(qū)域多個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性與肺癌的發(fā)生相關(guān)聯(lián)。該區(qū)域主要有兩個(gè)已知基因:人類端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因（human telomerase reverse transcriptase gene，hTERT）和唇腭裂跨膜蛋白1樣蛋白基因(cleft lip and palate transmembrane1 like gene，CLPTM1L)。
　　hTERT是端粒酶的催化亞基，為端粒

4、酶活性的必需和限速成分，其水平?jīng)Q定細(xì)胞端粒酶活性;抑制hTERT可降低端粒酶的活性，抑制癌細(xì)胞的生長;而hTERT的介入可使正常細(xì)胞端粒酶陽性進(jìn)而延長細(xì)胞壽命。端粒酶通過催化端粒合成，保持端粒長度而維持細(xì)胞分裂能力，其活性與細(xì)胞增殖、衰老及腫瘤分化、浸潤、轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)。CLPTM1L是在篩選腫瘤順鉑耐藥相關(guān)基因時(shí)被發(fā)現(xiàn)的，因?yàn)榕c唇腭裂相關(guān)跨膜蛋白1基因(CLPTM1)類似而得名，編碼一種跨膜蛋白，在多種腫瘤組織如肺癌、腦膠質(zhì)瘤、基底

5、細(xì)胞癌、乳腺癌等中均有表達(dá)。CLPTM1L基因在順鉑抵抗的卵巢癌細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào)，而且能誘導(dǎo)順鉑敏感的卵巢癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。
　　本次研究我們選取TERT rs2736098和CLPTM1L rs401681兩個(gè)位點(diǎn)的基因多態(tài)性，采用病例-對照研究的方法，分析它們與男性肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，并進(jìn)一步探索暴露危險(xiǎn)因素與基因多態(tài)性的交互作用，來了解男性肺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素，有助于肺癌高危人群的篩查、早期診斷和治療。
　　實(shí)驗(yàn)對象與方法

6、：
　　本研究采用病例-對照的研究方法，病例來源于沈陽市某三級(jí)甲等醫(yī)院有明確組織病理學(xué)確診的男性肺癌患者共366例，對照則按性別、年齡（±5歲）進(jìn)行頻數(shù)成組匹配，選取同期在體檢中心體檢的健康男性共366例。本研究經(jīng)中國醫(yī)科大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對象均簽署知情同意書。采集所有研究對象的靜脈血，并收集其人口學(xué)資料和相關(guān)暴露因素的信息。
　　應(yīng)用經(jīng)典酚-氯仿法提取血液中的DNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Taqmanreal-

7、time PCR)方法進(jìn)行DNA擴(kuò)增并檢測TERT rs2736098和CLPTM1L rs401681位點(diǎn)基因多態(tài)性。運(yùn)用SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析，所有的統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，以P＜0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的判斷標(biāo)準(zhǔn)。用t檢驗(yàn)、x2檢驗(yàn)比較人口學(xué)特征、相關(guān)危險(xiǎn)因素暴露、SNP基因型在病例組和對照組之間的分布是否有差異。以單因素Logistic回歸模型計(jì)算各因素的比值比(OR)及其95％可信區(qū)間(CI)，分析兩基

8、因多態(tài)性與男性肺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)間的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　與TERT rs2736098位點(diǎn)CC基因型人群相比，攜帶TT基因型人群發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其1.99倍（OR=1.99，95％CI=1.22-3.23，P=0.006）;攜帶T等位基因人群發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是攜帶C等位基因人群的1.33倍(OR=1.33，95％CI=1.07-1.65，P=0.011)。TERT rs2736098位點(diǎn)攜帶T等位基因的人群發(fā)生肺腺癌的危險(xiǎn)高

9、于攜帶C等位基因人群，OR=1.36，95％CI=1.01-1.85，P=0.046;攜帶TT基因型的人群危險(xiǎn)性高于攜帶CC基因型的人群，OR=1.98，95％CI=1.02-3.85，P=0.045;該位點(diǎn)攜帶T等位基因的人群發(fā)生肺鱗癌的危險(xiǎn)性是攜帶C等位基因人群的1.27倍(OR=1.27，95％CI=1.00-1.61，P=0.049);攜帶TT基因型人群的危險(xiǎn)性是攜帶CC基因型人群的2.05倍(OR=2.05，95％CI=1.1

10、9-3.52，P=0.009)。吸煙者患肺癌的危險(xiǎn)性升高，OR=2.20，95％CI=1.62-2.97，P=0.000;吸煙指數(shù)＞400的男性患肺癌的危險(xiǎn)性顯著升高，OR=3.20，95％CI=2.27-4.50，P=0.000。與攜帶TERT CC基因型非吸煙者相比，攜帶TERTTT基因型非吸煙者發(fā)生肺癌的風(fēng)險(xiǎn)是其2.23倍(OR=2.23，95％CI=1.10-4.52，P=0.026);攜帶CC基因型吸煙者發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其2

11、.61倍(OR=2.61，95％CI=1.63-4.33，P=0.000);攜帶CT基因型吸煙者發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其2.80倍(OR=2.80，95％CI=1.75-4.48，P=0.000);攜帶TT基因型吸煙者發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其4.87倍(OR=4.87，95％CI=2.38-9.98，P=0.000)。與攜帶CLPTM1L CC基因型非吸煙者相比，攜帶CC基因型吸煙者發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其2.07倍（OR=2.07，95％CI=1

12、.33-3.23，P=0.001）;攜帶CT基因型吸煙者發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其1.82倍（OR=1.82，95％CI=1.14-2.90，P=0.012）;攜帶TT基因型吸煙者發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性是其2.56倍(OR=2.56，95％CI=1.24-5.28，P=0.011)。
　　結(jié)論：
　　1、TERT rs2736098位點(diǎn)基因多態(tài)是男性肺癌發(fā)生的易感因素，包括肺腺癌和肺鱗癌。
　　2、吸煙是男性肺癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素。<