非小細(xì)胞肺癌中Rb、CDK-2蛋白表達(dá)及與HPV感染的關(guān)系研究.pdf

1、目的：⑴探討HPV感染在NSCLC發(fā)生中的病因?qū)W意義并分析HPV感染與臨床病理特征的關(guān)系；⑵研究NSCLC中HPV感染與Rb、CDK-2蛋白表達(dá)的關(guān)系，并初步探討HPV導(dǎo)致NSCLC發(fā)生的分子機(jī)制；⑶分析Rb、CDK-2蛋白表達(dá)與NSCLC發(fā)生及臨床病理特征的關(guān)系。
　　 方法：60例標(biāo)本均取自華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院手術(shù)切除標(biāo)本，其中NSCLC組織47例，肺良性病變組織13例（肺結(jié)核4例、炎性假瘤5例、肺大皰4例），

2、所有患者術(shù)前未經(jīng)放療和化療。47例NSCLC中鱗癌29例，腺癌18例；高、中、低分化肺癌分別為12、18、17例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移28例；吸煙者33例。肺良性病變13例作為對(duì)照組。所有標(biāo)本選定后均收集并記錄其年齡、性別、吸煙史、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)類型等資料。①采用PCR方法選用HPV16型E6、HPV18型E7特異性引物分別檢測(cè)47例NSCLC及13例肺良性病變組織HPV感染情況。②免疫組化SP方法檢測(cè)Rb蛋白與CDK-2蛋白在47例NSCL

3、C及13例肺良性病變組織中的表達(dá)情況。IHC染色結(jié)果均采用圖像處理系統(tǒng)進(jìn)行圖像采集，所有數(shù)據(jù)由SPSS for windows 13.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 結(jié)果：⑴47例NSCLC和13例肺良性病變組織中HPV感染和Rb蛋白、CDK2蛋白表達(dá)結(jié)果。采用PCR方法對(duì)HPV16/18亞型進(jìn)行檢測(cè)，肺癌組織中HPV DNA檢出率為42.55%(20/47)，肺良性病變組中，HPV DNA檢出率為7.69%（1/13）

4、，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。采用免疫組化SP法檢測(cè)Rb蛋白和CDK2蛋白表達(dá)情況，肺癌組織中Rb蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為68.09%（32/47），而13例肺良性病變組織中則全部表達(dá)Rb蛋白，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示Rb蛋白失活可能是肺癌發(fā)生過(guò)程中的因素之一；肺癌組織中CDK2蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為82.98%（39/47），而CDK2蛋白在肺良性病變組織中則不表達(dá)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑵47例NSCLC中HPV陽(yáng)性組

5、和HPV陰性組的Rb蛋白和CDK2蛋白表達(dá)情況。HPV陽(yáng)性組中Rb蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為45.00%（9/20），而HPV陰性組中Rb蛋白陽(yáng)性表達(dá)率為85.19%（23/27），兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），此結(jié)果提示HPV感染可能直接或間接的影響Rb蛋白的表達(dá)及其活性；HPV陽(yáng)性組中全部表達(dá)CDK2蛋白，HPV陰性組中CDK2陽(yáng)性表達(dá)率為70.37%（19/27），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑶47例NSCLC中HPV感染

6、、Rb蛋白及CDK2蛋白表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。NSCLC中HPV感染與患者年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無(wú)明顯相關(guān)性，但與NSCLC組織學(xué)類型、分化程度及吸煙有關(guān)（P<0.05）。HPV感染率在肺鱗癌中為55.17%（16/29）顯著高于腺癌中的感染率22.22%（4/18）；HPV感染在NSCLC高、中、低分化組中感染率分別為16.67%（2/12）、66.67%（12/18）、35.29%（6/17），三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0

7、5），而且中、低分化組感染率較高；吸煙患者HPV感染率為54.54%（18/33）顯著高于不吸煙患者14.29%（2/14）。利用IHC方法分別檢測(cè)47例NSCLC組織中Rb蛋白和CDK2蛋白表達(dá)情況，并分析其與臨床病理參數(shù)（年齡、性別、吸煙史、組織學(xué)類型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）的相關(guān)性。NSCLC組中Rb蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與上述臨床病理參數(shù)無(wú)關(guān)；CDK-2蛋白在高、中、低分化程度肺癌組中陽(yáng)性表達(dá)率分別為58.33%（7/12）、83.33

8、%（15/18）、100%（17/17），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示CDK2蛋白陽(yáng)性表達(dá)與肺癌分化程度相關(guān)，而經(jīng)分析CDK2蛋白表達(dá)與其他臨床病理參數(shù)無(wú)相關(guān)性。
　　 結(jié)論：①NSCLC組織中高危型HPV16/18型感染率顯著高于良性對(duì)照組，且與NSCLC組織類型、分化程度及吸煙史有關(guān)，提示高危型HPV感染可能在NSCLC發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮一定的作用；②NSCLC組織中Rb蛋白表達(dá)程度與良性病變組比較有顯著差異，且在肺癌

9、組中Rb蛋白異常表達(dá)與HPV感染相關(guān)，其機(jī)制可能為HPV通過(guò)E7蛋白與PRb形成E7-PRb復(fù)合體而引起PRb的降解失活，從而參與NSCLC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程；③NSCLC組織中CDK2蛋白表達(dá)程度與良性病變組比較有顯著差異，且在肺癌組CDK-2蛋白高表達(dá)與HPV感染有關(guān)，提示HPV可能通過(guò)作用于細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子，從而使細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控，誘發(fā)腫瘤細(xì)胞的增殖和發(fā)展；④Rb、CDK-2蛋白表達(dá)水平均與HPV陽(yáng)性的NSCLC密切相關(guān)，它們可能與H