清胰解毒湯對重癥急性胰腺炎大鼠血清胃動素的影響.pdf

1、目的:建立重癥急性胰腺炎大鼠模型,給予清胰解毒湯灌胃治療,檢測血中胃動素、淀粉酶含量,藉以評價清胰解毒湯對胃動素的作用,探討其治療重癥急性胰腺炎的藥理作用機制,為臨床應用提供實驗基礎,為篩選有效方藥提供理論根據(jù)。
　　方法:SD雌雄性普通級大鼠,適應性飼養(yǎng)一周,選擇雌雄大鼠各4只,進行預實驗,剩余48只,隨機分為6組,每組8只,分別是:空白組,重癥急性胰腺炎模型組,中藥低劑量組,中藥高劑量組,奧曲肽+中藥低劑量組,奧曲肽組?？瞻捉M

2、:大鼠禁食24小時,不禁水,分別給予實驗大鼠腹腔注射生理鹽水,40ml/kg,分三次注射完畢,中間間隔1小時,實驗大鼠于造模2小時后給予生理鹽水7.5ml/kg,灌胃,6小時一次,共四次。取血測胃動素和血淀粉酶,取組織觀察病理變化。重癥急性胰腺炎模型組:先配制好20％的左旋精氨酸溶液,測PH值為11.80,用濃鹽酸將左旋精氨酸溶液調(diào)至PH值7.4左右,11時20分開始造模,分別給予大鼠精氨酸溶液,劑量為3mg/g,共3次,中間間隔1小時

3、,造模后大鼠禁食24小時,不禁水,取血測胃動素和血淀粉酶,取組織觀察病理變化,確定造模成功。中藥低劑量組:造模方法同重癥急性胰腺炎組,實驗大鼠于造模2小時后給予中藥清胰解毒湯顆粒8.9g/kg,給藥體積為7.5ml/kg,中藥低劑量灌胃治療組按公式Db=Da×Kb/Ka(成人用量相當于生藥為每日105g,按體重60kg計算,其劑量Da為1.75g/kg,查表Kb:0.71,Ka:0.11。Db為大鼠每千克體重用藥量,Da為成人每千克體重

4、用藥量,kb、ka為用藥量常數(shù)),得出Db=11.3g/kg,濃度為1.189g/ml,每6小時灌胃一次,共4次,取血測胃動素和血淀粉酶,取組織觀察病理變化。中藥高劑量組:造模方法同重癥急性胰腺炎組,造模后2小時后,給予中藥清胰解毒湯顆粒44.5g/kg,因高劑量組5倍劑量不能溶解,故改為10ml/kg,每6小時灌胃一次。取血測胃動素和血淀粉酶,取組織觀察病理變化。奧曲肽+中藥低劑量組:造模方法同重癥急性胰腺炎組,造模2小時后,將奧曲肽

5、0.1mg溶于5ml生理鹽水中,給0.5μg/100g,于造模后大鼠四肢部皮下注射,中藥以8.9g/kg,給藥體積為7.5ml/kg灌胃,均為6小時一次。取血測胃動素和血淀粉酶,取組織觀察病理變化。奧曲肽組:造模方法同重癥急性胰腺炎組,造模2小時后,將奧曲肽0.1mg溶于5ml生理鹽水中,給0.5μg/100g,于造模后大鼠四肢部皮下注射,每6小時一次。取血測胃動素和血淀粉酶,取組織觀察病理變化。以上造模方法均參考賴銘裕,梁志海,唐國都

6、,孫學成等發(fā)表的腹腔注射左旋精氨酸誘導急性壞死性胰腺炎大鼠模型的文章。胃動素的測定:取動脈血2ml,注入含7.5%的EDTA二鈉30μl和抑肽酶40μl的試管中,混勻,4℃離心,3500rpm,離心10min,分離血漿,取上清測定,結果計算:以B/T計算NSB、S0結合百分率,以B/BO計算標準及待測樣品結合率百分率,在半對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線,并查出樣品值。
　　結果:
　　血清胃動素及淀粉酶:
　　1.空白組與重

7、癥急性胰腺炎模型組:重癥急性胰腺炎模型組血淀粉酶水平高于空白組,胃動素低于空白組,二者統(tǒng)計學有差異。(P<0.05)
　　2.空白組與中藥低劑量組、中藥高劑量組、奧曲肽+中藥低劑量組、奧曲肽組,空白組血淀粉酶水平低于其他組,胃動素高于其他組,統(tǒng)計學有差異。(P<0.05)
　　3.重癥急性胰腺炎模型組與中藥低劑量組、中藥高劑量組、奧曲肽+中藥低劑量組、奧曲肽組:重癥急性胰腺炎模型組血淀粉酶水平高于中藥低劑量組、中藥高劑量組、

8、奧曲肽+中藥低劑量組、奧曲肽組,胃動素低于中藥低劑量組、中藥高劑量組、奧曲肽+中藥低劑量組、奧曲肽組,統(tǒng)計學有差異。(P<0.05)
　　4.中藥低劑量組與中藥高劑量組、奧曲肽+中藥低劑量組、奧曲肽組:中藥低劑量組與中藥高劑量組、奧曲肽組淀粉酶水平及胃動素水平無明顯差異。(P>0.05),中藥低劑量組與奧曲肽+中藥低劑量組,中藥低劑量組血淀粉酶水平高于奧曲肽+中藥低劑量組,胃動素低于奧曲肽+中藥低劑量組,二者統(tǒng)計學有顯著差異。(P

9、<0.01)
　　5.中藥高劑量組與奧曲肽+中藥低劑量組、奧曲肽組:中藥高劑量組與奧曲肽組,血淀粉酶、胃動素無明顯差異,(P>0.05),中藥高劑量組血淀粉酶水平高于奧曲肽+中藥低劑量組,胃動素低于奧曲肽+中藥低劑量組,二者統(tǒng)計學有差異。(P<0.01)
　　6.奧曲肽+中藥低劑量組與奧曲肽組:奧曲肽+中藥低劑量組血淀粉酶水平低于奧曲肽組,胃動素高于奧曲肽組,二者統(tǒng)計學有差異。(P<0.01)
　　病理表現(xiàn):
　

10、　空白組:正常組大鼠腹腔未見明顯異常,胰腺呈灰粉紅色,分葉甚多,表面有薄層疏松結締組織深入胰腺內(nèi)將胰腺分隔為許多小葉,無胃潴留、腹水、腸壁水腫壞死,鏡下胰腺組織結構緊密,細胞結構完整。
　　重癥急性胰腺炎模型組:SAP模型組大鼠的胰腺組織明顯的充血水腫,顏色變暗,色澤加深,體積增大,并見多個暗褐色壞死灶,胰腺周圍的脂肪組織可以見到脂肪皂化斑,可見胃潴留、大量血性腹水、腸壁水腫壞死。鏡下可見胰腺正常結構消失,腺體呈片狀壞死,大量淋巴

11、細胞和中性粒細胞浸潤,被膜下及間質(zhì)水腫明顯。
　　中藥低劑量組、中藥高劑量組、中藥低劑量組加奧曲肽組、奧曲肽組:大鼠的胰腺組織大部分充血、水腫減輕,色澤較淺,壞死灶較少,胰腺周圍脂肪組織的皂化斑的出現(xiàn)也較小,胃潴留、血性腹水、腸壁水腫壞死也較輕,其中中藥低劑量加奧曲肽組和奧曲肽組的療效更明顯。鏡下表現(xiàn):與SAP模型組比較,奧曲肽組、奧曲肽組加中藥低劑量組、中藥高劑量組、中藥低劑量組胰腺小葉組織多為局灶或小片狀壞死,出血、壞死較輕。