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1、目的:本研究旨在探討不同膽道灌洗液對(duì)大鼠供肝膽道保存的影響,以篩選出一種較為理想的膽道灌洗液,使膽道在冷保存期間獲得"器官"水平上的最佳保護(hù)。 方法:實(shí)驗(yàn)于2006-08/12在中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心完成。本實(shí)驗(yàn)因素包括膽道灌洗液與冷保存時(shí)間。不同的灌洗液分別為膽道灌洗液a[生理鹽水(NS),離體腎臟保存液(HCA)],膽道灌洗液b[HTK保存液(HTK),UW保存液(UW)]。冷保存時(shí)間為4h、8h、12h。采用
2、正交設(shè)計(jì)方法,選用[L<,9>(3<'4>)]正交表對(duì)本實(shí)驗(yàn)因素隨機(jī)分組,共分為9組。選擇健康雄性Wistar大鼠45只,隨機(jī)分為9組,每組5只。制作大鼠取供肝模型,按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分別選擇不同的膽道灌洗液進(jìn)行灌洗膽道,在相應(yīng)的冷保存時(shí)間取膽管組織進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。檢測(cè)指標(biāo)分別為光鏡下觀察膽管上皮細(xì)胞的變化,進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)評(píng)分(SP);采用TUNEL法進(jìn)行膽道上皮細(xì)胞凋亡檢測(cè),計(jì)算凋亡指數(shù)(AI);并且在電鏡下觀察膽管細(xì)胞的病理形態(tài)變化,及利用
3、圖像分析系統(tǒng)求出每張照片中所有膽道上皮細(xì)胞線粒體平均體積(V)和數(shù)密度(Nd)。 結(jié)果:45只大鼠進(jìn)入結(jié)果分析。通過(guò)正交設(shè)計(jì)的方差分析與直觀分析得出下列結(jié)果。①病理形態(tài)學(xué)評(píng)分(SP):膽道灌洗液b對(duì)供肝膽道的冷保存有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,HTK與UW灌洗均理想。②膽管上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI):膽道灌洗液a,膽道灌洗液b,冷保存時(shí)間對(duì)冷保存供肝膽道均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其中,HCA,HTK,4h冷保存時(shí)間較為理想,且三者結(jié)合效果最好;③膽道上皮細(xì)
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