HGF、c-Met及VEGF在鼻息肉中的表達及其臨床病理意義.pdf

1、背景：鼻息肉(nasal polyps,NP)是鼻腔和鼻竇粘膜的常見慢性疾病,以極度水腫的鼻粘膜在中鼻道形成單發(fā)或多發(fā)的息肉為臨床特征。作為耳鼻咽喉科的常見病和多發(fā)病,其在成人中的發(fā)病率為1％~2％,在支氣管哮喘、阿司匹林耐受不良、變應性真菌性鼻竇炎以及囊性纖維化病人中的發(fā)病率可達15％以上,手術和保守治療后復發(fā)率較高,給患者造成一定的心理和經濟負擔。其病因和發(fā)病機制尚不明確,近年來的研究表明可能與感染,免疫及細胞因子的作用有關。肝細胞

2、生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一種多功能的細胞因子,其具有多種生物活性如:促進細胞增殖分化、游走和擴散,器官生成,促進腫瘤細胞的浸潤等;除此之外,HGF還具有趨化作用并可以刺激血管內皮細胞增殖遷移,促進血管生成,目前HGF已被列為重要的促血管生成因子。c-Met蛋白是由原癌基因c-met編碼表達的一種細胞膜受體,目前它被認為是HGF唯一的受體,與HGF結合后組成信號通路后發(fā)揮作用。血管內皮生長因子

3、(vascularendothelial growth factor,VEGF)是血管內皮細胞特異性的多肽因子,有刺激血管內皮細胞增生,增加血管通透性并誘導新生血管生成的作用。目前國外有關HGF及c-Met在鼻息肉中的表達報道甚少,有關VEGF在鼻息肉組織中的表達報道不一,且在國內未見在鼻息肉發(fā)生發(fā)展中HGF、c-Met及VEGF三種蛋白的相關性研究。故本課題取30例鼻息肉手術后患者鼻息肉組織,與20例鼻中隔偏曲手術患者下鼻甲黏膜組織作

4、對照,檢測了這兩種組織中HGF、c-Met及VEGF蛋白的表達情況,并對他們之間的相關性進行研究,借以探討這三種因子在鼻息肉的發(fā)生發(fā)展中的生物學意義及相關的病理學機制。
　　材料與方法：1.臨床病例資料:以30例鼻息肉組織標本作為研究對象。所有病例臨床資料完整,所有病例術前半年內均無應用類固醇藥物、抗組胺及抗生素藥物史,亦不合并阿司匹林耐受不良。另取20例正常下鼻甲黏膜組織標本作為對照組。2.實驗方法和結果判定:對30例鼻息肉組織

5、和20例下鼻甲黏膜組織進行HE復染并采用免疫組化SP法檢測上述鼻息肉組織及正常下鼻甲黏膜組織標本中HGF蛋白、c-Met蛋白及VEGF蛋白的表達。三種分子均是以胞漿呈現(xiàn)棕黃和/或棕褐染色為陽性細胞,取染色強度和陽性細胞數(shù)百分比兩個指標打分相乘,所得結果>3分即為免疫反應陽性,進行結果判定。3.統(tǒng)計學分析:應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析,采用卡方檢驗(χ~2檢驗)和Fisher’s精確概率法進行顯著性檢驗,相關分析應用列聯(lián)表的關聯(lián)性

6、分析。檢驗標準:α=0.05。
　　結果：1.HE染色結果為細胞核呈藍色、深藍色或藍黑色,胞漿呈淡粉色或淡紅色。光鏡下見鼻息肉表面被覆以假復層纖毛柱狀上皮,部分可見鱗狀上皮化生?；啄ぴ龊?間質明顯水腫,間質內小血管擴張?？梢娤袤w增生,腺管呈現(xiàn)不規(guī)則形狀。在上皮下、血管和腺體周圍有較顯著的炎癥細胞浸潤,其中主要是嗜酸性粒細胞、淋巴細胞、漿細胞以及肥大細胞等。嗜酸性粒細胞為雙葉核、“熊貓眼”樣細胞。而下鼻甲黏膜組織中腺管多呈圓形,間

7、質炎癥細胞浸潤較少,嗜酸性粒細胞幾乎未見。2.HGF蛋白的陽性產物主要定位于細胞漿,呈棕黃色或棕褐色。光鏡下見其廣泛表達于鼻息肉組織中的黏膜上皮細胞、腺體細胞、血管內皮細胞以及間質內浸潤的炎癥細胞胞漿內。HGF蛋白在鼻息肉組織和正常下鼻甲黏膜組織中的陽性表達率分別為83.33％和30.00％,兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);在單側與雙側鼻息肉中的陽性表達率分別為50.00％和95.45％,兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05

8、)。3.c-Met蛋白陽性染色部位主要位于細胞胞漿,為棕黃色或棕褐色染色。光鏡下可見其主要表達于鼻息肉組織中的黏膜上皮細胞、腺體細胞、血管內皮細胞以及間質內浸潤的炎癥細胞胞漿內。c-Met蛋白在鼻息肉組織和對照組下鼻甲黏膜組織中陽性表達率分別為86.67％和25.00％。兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);在單側與雙側鼻息肉中的陽性表達率分別為25.00％和95.45％,兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4.VEGF的陽性

9、產物也主要定位于細胞漿,呈棕黃色或棕褐色染色。光鏡下可見其主要表達于血管內皮細胞、血管內附壁細胞以及間質內浸潤的炎癥細胞。VEGF蛋白在鼻息肉組織和對照組下鼻甲黏膜陽性表達率分別為76.67％和10.00％。兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);在單側與雙側鼻息肉中的陽性表達率分別為50.00％和100.0％,兩者比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。5.HGF蛋白表達陽性病例中,c-Met蛋白表達陽性率為96.00％,HGF蛋白表

10、達陰性病例中c-Met蛋白表達陽性率40.00％,經統(tǒng)計學分析,結果顯示列聯(lián)系數(shù)r=0.523,P<0.01,兩種蛋白在鼻息肉組織中的表達有關聯(lián)性。6.HGF和VEGF的共同表達部位在鼻息肉血管內皮細胞和間質內浸潤的炎癥細胞中。在血管內皮細胞內:HGF表達陽性的病例中,VEGF表達陽性率為92.00％,在HGF表達陰性的病例中,VEGF表達陽性率為0。經統(tǒng)計學分析,結果顯示列聯(lián)系數(shù)為r=0.630,P<0.01。在間質浸潤的炎癥細胞內:

11、HGF表達陽性的病例中,VEGF表達陽性率為88.00％,在HGF表達陰性的病例中,VEGF表達陽性率為20.00％。經統(tǒng)計學分析,結果顯示列聯(lián)系數(shù)為r=0.514,P<0.01。結果顯示在鼻息肉組織中,HGF和VEGF在血管內皮細胞和間質內浸潤的炎癥細胞中的表達有關聯(lián)性。7.c-Met蛋白表達陽性病例中,VEGF蛋白表達陽性率為88.46％,c-Met蛋白表達陰性病例中VEGF蛋白表達陽性率為0,經統(tǒng)計學分析,結果顯示列聯(lián)系數(shù)r=0.

12、579,P<0.01,兩種蛋白在鼻息肉組織中的表達有關聯(lián)性。
　　結論：1.HGF及其受體c-Met蛋白在鼻息肉組織中呈高表達,HGF/c-Met結合后誘導上皮細胞的分裂增殖及損傷后的修復,并且引起血管內皮細胞的增殖和遷移,導致血管通透性增加,提示HGF/c-Met信號通路在鼻息肉的形成和發(fā)展中起到重要的作用。2.VEGF主要表達于鼻息肉組織中的血管內皮細胞及間質浸潤的炎癥細胞中,VEGF可誘導血管內皮細胞增殖,促進血管新生,增強

13、炎癥反應,提示VEGF在加重鼻息肉癥狀及為鼻息肉的發(fā)展提供營養(yǎng)支持等方面起到重要的作用。3.HGF、c-Met及VEGF這三種蛋白在鼻息肉中表達有相關性,提示其可能協(xié)同參與鼻息肉的生成與發(fā)展。4.HGF、c-Met及VEGF蛋白表達在單側鼻息肉組與雙側鼻息肉組的比較中差異有統(tǒng)計學意義,但在鼻息肉不同臨床分型、不同性別、不同年齡組(<18和≥18)的組內比較中差異無統(tǒng)計學意義。提示這三種蛋白參與了鼻息肉的形成過程,但是與其臨床分型、患者的