當歸多糖對小鼠造血干-祖細胞的動員作用及移植后重建造血的實驗研究.pdf

1、當歸作為中醫(yī)“補血、活iff"要藥已有數(shù)千年的臨床應用歷史。現(xiàn)代實驗研究證明：當歸化學成分復雜，當歸多糖(Angelicapolysaccharides，APS)是其主要化學成份之一。既往研究發(fā)現(xiàn)：APS是當歸中促進造血的有效成分，APS對正?；蜇氀∈蟮乃柘翟煅婕毎?BFU-E、CFU-E、CFU-GM和CFU-MK)的增殖分化有顯著的促進作用；同時APS在體外可促進人紅系、粒單系及混合系造血組細胞的增殖分化，其作用機理可能是APS

2、通過促進造血微環(huán)境中的基質(zhì)細胞或內(nèi)皮細胞表達和分泌GM-CSF、IL-3等造血生長因子，從而促進早期造血細胞的發(fā)生，調(diào)節(jié)血細胞的生成。但目前尚未見APS對造血干細胞動員的研究報道。 近年來，造血干細胞移植(hematopoieticstemcelltransplantation，HSCT)在國內(nèi)外已得到廣泛開展，成為治療惡性血液病、多種實體瘤、部分遺傳性疾病、免疫缺陷病和以造血干細胞(hematopoieticstemcell，

3、HSC)為靶細胞的基因治療的有效方法。與骨髓移植相比，外周血干細胞移植(peripheralbloodstemcelltransplantation,PBSCT)因其具有采集安全方便、供者痛苦少、造血及免疫功能恢復快、受腫瘤細胞浸潤或污染的機會較少、潛在的抗殘留病優(yōu)勢等優(yōu)點，正被臨床廣泛接受，有替代骨髓移植之趨勢。但在正常狀態(tài)下，外周血中造血干／祖細胞(hematopoieticstemprogenitorcell，HSPC)的數(shù)量很少

4、，只有骨髓含量的10A-10％左右，難以達到足夠數(shù)量以保證移植成功。因此，PBSCT成功的前提技術之一是如何將骨髓中的HSPC動員到外周血中，以便采集到足夠數(shù)量的HSPC以保證移植后重建造血。目前以粒細胞集落刺激因子(granulocytecolony-stimulatingfactor，G-CSF)為代表的動員劑體內(nèi)注射仍存在許多不足之處，動員方案也有待優(yōu)化，所以尋找新的造血干細胞動員劑或優(yōu)化動員方案成為外周血造血干細胞移植領域的熱點

5、問題之一。 本研究以BALB／c小鼠為實驗動物模型，分為兩個部分進行實驗研究：1．APS對小鼠造血干／祖細胞動員作用的研究；2．APS動員的造血干／祖細胞移植重建造血衰竭小鼠造血功能的研究。本研究旨在從祖國醫(yī)學寶庫中尋找安全、高效的造血干細胞動員劑，促進外周血干細胞移植的廣泛開展，為當歸的臨床用藥和開發(fā)提供理論指導和實驗依據(jù)。 1.APS對小鼠造血干，祖細胞動員作用的研究 目的：探討APS對小鼠HSPC的動員作用

6、。 方法：首先應用統(tǒng)計學正交實驗設計方法【正交表L25(56)]，篩選出APS的最佳給藥劑量和采血時間；將BALB／c小鼠隨機分為4組(NS組、APS組、rhG-CSF組、rhG-CSF+APS組)，采用外周血WBC、LC計數(shù)、免疫細胞化學、流式細胞術，造血祖細胞體外半固體培養(yǎng)等技術方法，研究APS對外周血WBC、LC數(shù)、外周血CD34+細胞百分率、混合集落形成單位(colony-formingunite-mix，CFU-Mix

7、)數(shù)的影響。 結果：1．篩選出APS的最佳給藥劑量為4mg／kg，采血時間為第8天。2．APS作用后小鼠外周血WBC、LC數(shù)明顯高于NS組(P