GSTP1與吸煙相關(guān)肺腺癌的相關(guān)研究.pdf

1、目的:
　　1、通過檢測(cè)具有長期吸煙史(吸煙時(shí)間超過30年)或香煙煙霧接觸史(在未禁煙場(chǎng)所工作5天長達(dá)45年或平均每天出入這類場(chǎng)所13分鐘達(dá)60年)的肺腺癌患者的肺癌組織中 GSTP1、EGFR的基因表達(dá)情況,探討 GSTP1、EGFR與吸煙相關(guān)肺腺癌的關(guān)系。
　　2、制作的香煙萃取物(Cigarette smoke extract, CSE)作用于正常支氣管上皮細(xì)胞系、肺腺癌細(xì)胞系,檢測(cè)作用前后GSTP1的基因及蛋白表達(dá)情

2、況以及CSE對(duì)HBE, A549, NCI-H23, NCI-1299四種細(xì)胞系增殖生長的影響。
　　方法:
　　1、收集2012-2013年期間南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院心胸外科肺腺癌患者的肺癌組織及超過腫瘤邊緣5厘米以上的癌旁組織,采取實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)癌組織及癌旁組織中GSTP1及EGFR的基因表達(dá)情況。
　　2、使用紅雙喜牌烤煙型香煙制作香煙萃取物,并用含不同濃度CSE的培養(yǎng)基培養(yǎng)正常支氣管上皮細(xì)胞系及三種肺腺癌

3、細(xì)胞系,檢測(cè)培養(yǎng)前后GSTP1的表達(dá)情況。
　　3、采用MTT法檢測(cè)CSE對(duì)正常支氣管上皮細(xì)胞系及三種肺癌細(xì)胞系增殖生長的影響。
　　結(jié)果:
　　1、在28例標(biāo)本中,有10例肺腺癌組織EGFR和GSTP1低表達(dá),13例EGFR和GSTP1高表達(dá),且在同一標(biāo)本中EGFR和GSTP1表達(dá)量相似。
　　2、相較于HBE,A549和NCI-1299兩種腺癌細(xì)胞系GSTP1和EGFR基因表達(dá)表達(dá)下調(diào),且同一細(xì)胞系中GSTP

4、1和EGFR表達(dá)量相仿。用不同濃度CSE處理HBE細(xì)胞系,GSTP1和EGFR基因表達(dá)量均有不同程度的上調(diào),且GSTP1和EGFR基因表達(dá)量相似。用不同濃度CSE處理A549,NCI-H23,NCI-1299三種肺癌細(xì)胞系,GSTP1在NCI-H23中表達(dá)上調(diào),在A549和NCI-1299中表達(dá)下調(diào)。
　　3、CSE2處理HBE, A549, NCI-H23, NCI-1299細(xì)胞系2 h,6 h,12 h,24 h,48 h后,

5、GSTP1蛋白表達(dá)在四種細(xì)胞系中均有不同程度上調(diào)。
　　4、CSE處理四種細(xì)胞系后,HBE, A549, NCI-H23, NCI-1299細(xì)胞系半數(shù)抑制濃度IC50分別為3％,5%,3%,8%。
　　結(jié)論:
　　1、有長期吸煙史或香煙煙霧接觸史的肺腺癌患者中部分患者出現(xiàn) GSTP1表達(dá)上調(diào),提示 GSTP1參與了吸煙相關(guān)肺腺癌的發(fā)生發(fā)展過程,同時(shí) GSTP1和EGFR可能存在協(xié)調(diào)作用。
　　2、用CSE處理HB

6、E后,GSTP1基因和蛋白均表達(dá)上調(diào),證實(shí)了GSTP1參與了香煙煙霧有毒物質(zhì)的清除過程,同時(shí)這一過程可能有EGFR的參與。
　　3、經(jīng)CSE處理后的正常支氣管細(xì)胞系和三種肺癌細(xì)胞系GSTP1基因表達(dá)有細(xì)胞差異性(在HBE和NCI-H23中上調(diào),在A549和NCI-1299中表達(dá)下調(diào)),以及蛋白表達(dá)均上調(diào),說明GSTP1在正常肺細(xì)胞和癌細(xì)胞均發(fā)揮了香煙煙霧有毒物質(zhì)的清除作用。相對(duì)于三種肺癌細(xì)胞,正常細(xì)胞中GSTP1上調(diào)更為明顯,提示