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文檔簡(jiǎn)介
1、目的探討微波固化及微波固化聯(lián)合局部瘤區(qū)注射高聚生、微波固化聯(lián)合口服高聚生治療肝癌對(duì)腫瘤再生長(zhǎng)的抑制作用及治療后局部免疫狀態(tài)的變化和其對(duì)療效的影響。 材料與方法將400只制作成功的長(zhǎng)有10mm×10mm癌灶的H22鼠肝癌皮下移植模型鼠按處理方法不同隨機(jī)分成6組,分別為:A:?jiǎn)渭兾⒉ü袒M、B:微波后口服高聚生組、C:微波后原瘤區(qū)注射高聚生組、D:?jiǎn)渭兛诜呔凵M、E:?jiǎn)渭兞鰠^(qū)注射高聚生組、F:未處理組。對(duì)各組進(jìn)行相應(yīng)處理后第二天將
2、A-F各組分別隨機(jī)分成四個(gè)亞組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)給各亞組分別再接種107、106、105個(gè)H22癌細(xì)胞,接種部位為左側(cè)背部皮下,距原接種癌灶約3cm,此為再接種癌灶。每個(gè)亞組內(nèi)用正常鼠增設(shè)一對(duì)照組G,按同樣方法作左側(cè)背部皮下癌細(xì)胞接種。在隨后的兩個(gè)月內(nèi)觀察再接種癌灶的發(fā)癌情況、原癌灶復(fù)發(fā)及生長(zhǎng)情況,同時(shí)對(duì)荷瘤鼠在各種治療方法后進(jìn)行免疫學(xué)檢查,通過(guò)荷瘤鼠免疫功能狀態(tài)的改變對(duì)各種治療方法進(jìn)行評(píng)估。用stata7.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用
3、均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,計(jì)量資料用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)。 結(jié)果1、H22鼠肝癌皮下移植模型的病理特征與腹水中癌細(xì)胞是一致的,證實(shí)模型制作成功。2、癌灶固化后第二天切除作病理學(xué)檢查顯示肝癌組織呈完全性凝固性壞死,癌灶內(nèi)未見(jiàn)有存活的癌細(xì)胞。3、各組一般狀況及生存率、再接種瘤發(fā)癌及生長(zhǎng)情況(1)全身狀況:A、B、C組小鼠全身狀況較好,D、E、F組小鼠全身狀況明顯差。(2)原接種瘤灶的局部情況:A、B、C組小鼠在固化后約2-3周左右癌灶
4、整個(gè)脫落,癌灶區(qū)皮膚光滑度及色澤均與正常無(wú)異并可長(zhǎng)出正常毛發(fā)。DⅢ有1例原癌灶在治療后13天時(shí)消退,EⅡ有2例原癌灶分別在8、10天時(shí)完全消退。F組無(wú)消退現(xiàn)象。(3)兩個(gè)月生存率:A、B、C、G組的2個(gè)月生存率均為100%;D組2個(gè)月生存率分別為61.5%、78.6%、92.3%;E組2個(gè)月生存率分別為61.5%、76.9%、92.3%;F組2個(gè)月生存率分別為23.1%、42.9%、57.1%。A、B、C、G組總的生存率較D、E、F組明
5、顯高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。D、E兩組總的生存率之間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。而D、E組與F組相比總的生存率之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。(4)再接種癌灶的發(fā)癌率:隨著接種細(xì)胞數(shù)的增多,各組發(fā)癌率均呈上升趨勢(shì),以D、E、F組最為顯著,B、C組發(fā)癌率升漲幅度最小。從總的發(fā)癌情況來(lái)看,F(xiàn)組發(fā)癌率最高,B、C組發(fā)癌率最低。當(dāng)再接種細(xì)胞數(shù)為105時(shí),A、B、C、D、E、G各組發(fā)癌率與F組比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
6、A、B、C、D、E、G各組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)再接種細(xì)胞數(shù)為106時(shí),A、B、C、G組發(fā)癌率與D、E、F組比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;D、E組發(fā)癌率與F組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;A、G組發(fā)癌率與B、C組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)再接種細(xì)胞數(shù)為107時(shí),A、B、C、G組發(fā)癌率與D、E、F組比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;D、E組發(fā)癌率與F組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;A、G組發(fā)癌率與B、C組比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);A組與G
7、組之間、B組與C組之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)再接種癌灶生長(zhǎng)情況:各組在接種107、106之間瘤體大小沒(méi)有顯著性差異;各組瘤體大小比較,D、E、F>A、B、C組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);F組的生長(zhǎng)曲線比其它組陡峭,D、E組于再接種瘤一個(gè)月前較F組生長(zhǎng)曲線平緩,此后生長(zhǎng)曲線變?yōu)槎盖团cF組相似。4、免疫組化結(jié)果(1)A、B、C、D、E組均于治療后8天、14天上述陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)值較治療前明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0
8、.05);但兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);各組與F組比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。治療后30天,上述陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)值降低,與治療后8天、14天比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。至治療后60天,進(jìn)一步降低,但除B、C兩組與治療30天時(shí)比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外,余各組兩時(shí)間點(diǎn)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義??傊?,各組在治療后8天、14天與治療后30天、60天比較,即以治療后30天為一時(shí)間分界,前后相比上
9、述陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)值差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組在相同時(shí)間點(diǎn)比較,治療后8天、14天、30天,B、C組CD3、CD4、CD8陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)值明顯高于其余各組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05);D、E三組在治療后30天、60天與F組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(2)再接種瘤及其周邊組織免疫細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)比較:A、B、C、D、E、G組再接種瘤及周邊組織CD3、CD4、CD8陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)于治療后14天時(shí)較F
10、組多,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);于治療后30天時(shí),各組上述陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)明顯減少,但CD3、CD4陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)與F組比較,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);CD8陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)與F組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);于治療后60天時(shí),各組CD3、CD4陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)進(jìn)一步減少,CD8陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)未見(jiàn)明顯變化。各組間CD3、CD4、CD8陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)各組治療前腫瘤組織及其周邊未見(jiàn)IL-
11、2陽(yáng)性表達(dá),治療后A、B、C三組于凝固壞死區(qū)外緣及其周?chē)M織中可見(jiàn)IL-2陽(yáng)性表達(dá),B、C組表達(dá)最高,與治療前比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),其次為A組,與治療前比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);D、E組可于腫瘤周邊見(jiàn)IL-2陽(yáng)性表達(dá),但與治療前比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。A、B、C三組IL-2陽(yáng)性表達(dá)較D、E組明顯高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A、B、C三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)
12、。再接種瘤及其周邊組織IL-2陽(yáng)性表達(dá)各組之間比較與前一致,即A、B、C三組較D、E、F組明顯高,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。(4)各組治療前原腫瘤內(nèi)及周邊可見(jiàn)不同程度TGFβ陽(yáng)性表達(dá),治療后兩月A、B、C三組原瘤區(qū)及周邊組織TGF陽(yáng)性表達(dá)明顯減少,治療前后比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);治療前后TGFβ陽(yáng)性表達(dá)程度分布不同,差異有顯著性意義(P<0.05),治療前TGFβ陽(yáng)性表達(dá)以“++”為主,其中“
13、+++”亦占較大比例,治療后TGFβ陽(yáng)性表達(dá)以“+”為主,其中未見(jiàn)“+++”表達(dá)。兩月后D、E、F組原瘤區(qū)及周邊組織可見(jiàn)不同程度TGFβ陽(yáng)性表達(dá),與治療前比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);治療前后TGFβ陽(yáng)性表達(dá)程度分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);D、E、F組與A、B、C三組比較,TGFβ陽(yáng)性表達(dá)差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論微波凝固術(shù)可在徹底殺滅小鼠皮下H22移植瘤的同時(shí)提高機(jī)體細(xì)胞免疫力,抵抗一定數(shù)量同
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