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1、腫瘤血管生成是腫瘤生長和侵襲的基礎(chǔ),血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)是最重要的血管生成因子,在許多人類腫瘤均可檢測(cè)到了這種因子。在文獻(xiàn)報(bào)道中VEGF水平與多種腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。我們研究的目的是檢測(cè)正常人與膠質(zhì)瘤病人血漿和尿液中VEGF水平,以闡釋腦膠質(zhì)瘤患者手術(shù)前后血管內(nèi)皮生長因子在尿液和血漿中的含量及意義。 方法:應(yīng)用雙抗體夾心法(間接酶聯(lián)免疫吸附法)定量分析血漿和尿液中VEGF165水平。血漿和尿液的樣本來自于12例
2、正常人和37例手術(shù)前后膠質(zhì)瘤病人(Ⅰ級(jí)6人,Ⅱ級(jí)10人,Ⅲ級(jí)9人,Ⅳ級(jí)12人,根據(jù)WHO2000分級(jí))。將血標(biāo)本注入含有10%乙二胺四醋酸鈉(EDTA-Na)的負(fù)壓試管里,將尿液標(biāo)本注入塑料試管中;收集的標(biāo)本立即置于5000轉(zhuǎn)每分鐘的高速離心機(jī)中離心,將離心的上清液存放在-70℃冰箱中保存待測(cè)。使用CytElisaTMHumanVEGF試劑盒,檢測(cè)各個(gè)樣本的VEGF含量。應(yīng)用CurveExpert1.3ELISA分析軟件擬合出光密度(O
3、.D.)值與其相對(duì)應(yīng)的濃度之間的曲線關(guān)系,利用這條擬合出的曲線求得待測(cè)樣本的OD值所對(duì)應(yīng)的濃度值。所測(cè)VEGF數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示。統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)用SAS8.0軟件,采用T檢驗(yàn),方差分析和Spearman等級(jí)相關(guān)分析。將P值小于0.05做為統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異的標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果:對(duì)12例正常人與37例膠質(zhì)瘤患者手術(shù)前后的VEGF水平進(jìn)行比較。在正常人群血漿樣本中檢測(cè)到的x±S值為56.97±13.83pg/ml,尿液中的值為
4、103.82±11.36pg/ml,與術(shù)前膠質(zhì)瘤患者血漿、尿液中VEGF各自的總體含量均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。不同分級(jí)膠質(zhì)瘤患者術(shù)前尿液的VEGF水平:Ⅰ級(jí)127.32±4.67pg/ml,Ⅱ級(jí)193.82±28.75pg/ml,Ⅲ級(jí)438.47±43.48pg/ml,Ⅳ級(jí)632.92±59.74pg/ml。通過Spearman等級(jí)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),膠質(zhì)瘤患者尿液中VEGF水平與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)呈正相關(guān)。而血漿中VEGF水平與膠質(zhì)瘤病理分級(jí)無此關(guān)系
5、。血漿VEGF水平在術(shù)前全切組中(30人)檢測(cè)到的x±S值為140.68±79.90pg/ml顯著高于術(shù)后VEGF值77.29±31.67pg/ml。而在部分全切組中(7人)術(shù)前(178.96±94.71pg/ml)和術(shù)后(166.1±83.70pg/ml)的值無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:膠質(zhì)瘤患者血、尿中的VEGF水平明顯高于正常人。尿漿中VEGF水平對(duì)于評(píng)估膠質(zhì)瘤的惡性生物學(xué)行為具有重要的意義,可作為膠質(zhì)瘤病理分級(jí)的生物學(xué)標(biāo)志。手
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