HMGB1在卵巢癌紫杉醇耐藥中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:
　　 為卵巢癌紫杉醇耐藥機(jī)制的研究提供與之相關(guān)蛋白質(zhì)的信息及其生物功能。探討HMGB1與卵巢癌紫杉醇耐藥的相關(guān)性及其在卵巢癌紫杉醇耐藥中的可能作用機(jī)制，為卵巢癌紫杉醇耐藥機(jī)制的研究提供新線索和一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 在前期研究中我們采用蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株和敏感細(xì)胞株的總蛋白進(jìn)行分析，找到了24個(gè)差異表達(dá)蛋白。本研究首先應(yīng)用生物信息學(xué)將蛋白質(zhì)組學(xué)所獲得的這些差異表達(dá)蛋白的信

2、息進(jìn)行歸納、整合，運(yùn)用BinGO軟件進(jìn)行檢索、分析，從而篩選并預(yù)測(cè)這些差異表達(dá)蛋白的功能。然后選擇其中一個(gè)因子HMGB1蛋白為目的蛋白，采用蛋白免疫印跡法和細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)HMGB1蛋白在卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株和敏感細(xì)胞株中的表達(dá)水平和細(xì)胞內(nèi)的定位。
　　 結(jié)果:
　　 1、通過生物信息學(xué)，建立了24個(gè)差異表達(dá)蛋白相互作用蛋白的分子網(wǎng)絡(luò);BinGO分析結(jié)果顯示24個(gè)差異表達(dá)蛋白參與了多種細(xì)胞過程，且這些差異蛋白在糖代謝

3、和調(diào)控凋亡方面表現(xiàn)為富集現(xiàn)象;進(jìn)一步從調(diào)控凋亡方面研究耐藥，發(fā)現(xiàn)HMGB1、PHB、ANXA1、HSPB1、SFN等幾個(gè)蛋白與凋亡關(guān)系密切。
　　 2、蛋白免疫印跡法結(jié)果顯示HMGB1在卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株(SKOV3/Taxol-25)和敏感細(xì)胞株(SKOV3)中均有表達(dá)，且在SKOV3/Taxol-25中表達(dá)更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3、細(xì)胞免疫熒光法結(jié)果顯示HMGB1蛋白在卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)

4、胞株（SKOV3/Taxol-25）和敏感細(xì)胞株(SKOV3)的胞漿、胞核中均有不同程度表達(dá)，但在耐藥細(xì)胞株(SKOV3/Taxol-25)中的陽性表達(dá)率更高，差異有顯著性(P＜0.01);并且耐藥細(xì)胞株(SKOV3/Taxol-25)細(xì)胞胞漿的陽性表達(dá)率也高于敏感細(xì)胞株(SKOV3)細(xì)胞胞漿的陽性表達(dá)率，差異有顯著性(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1、本實(shí)驗(yàn)為卵巢癌紫杉醇耐藥機(jī)制的研究提供了大量生物信息，篩選了