Survivin mRNA在大腸癌患者外周血中表達(dá)的研究.pdf

1、目的:大腸癌是我國(guó)發(fā)病率很高的惡性腫瘤，其早期診斷有重要意義。早期發(fā)現(xiàn)播散在外周血中的微量瘤細(xì)胞對(duì)估計(jì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有重要意義。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(reversetranscriptasepolymerasechainreactionenzymelinkedimmunosorbentassay，RT-PCR-ELISA)用于檢測(cè)腫瘤特異性基因的表達(dá)，操作簡(jiǎn)單，敏感性高，可有效檢測(cè)大腸癌患者外周血中的微量癌細(xì)胞。

2、Survivin是凋亡抑制蛋白(IAP)家族新成員，位于人類染色體17q25，編碼一個(gè)16.5KD的蛋白質(zhì)，Survivin蛋白只有一個(gè)BIR區(qū)(桿狀病毒IAP重復(fù)區(qū))羧基端缺乏鋅指折疊結(jié)構(gòu)，Survivin表達(dá)于胚胎組織，而在正常成人組織中停止表達(dá)，但在人類各種惡性腫瘤組織中重新表達(dá)，可作為腫瘤標(biāo)記物。本實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR-ELISA方法檢測(cè)大腸癌患者外周血中SurvivinmRNA的表達(dá)情況，分析大腸癌患者外周血中Survivin

3、mRNA表達(dá)的臨床意義及作為腫瘤標(biāo)記物的敏感性和特異性。 材料與方法:一、實(shí)驗(yàn)材料本研究收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科大腸癌患者外周血標(biāo)本30例及25例健康人外周血做對(duì)照。 二、實(shí)驗(yàn)方法取患者外周血1ml，EDTA抗凝，離心分離血細(xì)胞，提取總RNA，RT-PCR反應(yīng)后，將產(chǎn)物在包被SurvivinmRNA探針的ELISA板上進(jìn)行分子雜交，之后進(jìn)行ELISA反應(yīng)，經(jīng)酶標(biāo)儀(波長(zhǎng)為450/630nm)讀取光密度值，繪制標(biāo)

4、準(zhǔn)曲線計(jì)算標(biāo)本SurvivinmRNA濃度。采用X2檢驗(yàn)比較SurvivinmR-NA在患者及健康人外周血表達(dá)和SurvivinmRNA表達(dá)與大腸癌病理生物學(xué)特點(diǎn)的關(guān)系，P＜0.05認(rèn)為有顯著差異。 結(jié)果:一、SurvivinmRNA在大腸癌患者及健康人外周血中的表達(dá)情況30例大腸癌患者中SurvivinmRNA陽性表達(dá)者有17例(56.7％)，25例健康人中SurvivinmRNA陽性表達(dá)者有2例(8％)。兩者間有顯著性差異(

5、P＜0.05)。 二、大腸癌患者外周血中SurvivinmRNA的表達(dá)與大腸癌病理生物學(xué)特點(diǎn)間的關(guān)系 SurvivinmRNA的陽性率在腫瘤＜5cm為42.9％(6/14)≥5em為68.8％(11/16)；大體分型：早期癌100％(2/2)，隆起型為40％(4/10)，潰瘍型為61.1％(11/18)；組織學(xué)分型：分化良好者為54.5％(12/22)，分化不良者62.5％(5/8)；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為31.3％(5/16

6、)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為85.7％(12/14)；Dukes分期：A+B者為31.3％(5/16)，C者為85.7％(12/14)。SurvivinmRNA在大腸癌患者外周血中的表達(dá)與腫瘤大小、大體類型、組織類型無顯著性差異(P＞0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Dukes分期有顯著性差異(P＜0.05)。 三、外周血SurvivinmRNA表達(dá)作為大腸癌診斷指標(biāo)的分析外周血SurvivinmRNA作為大腸癌診斷指標(biāo)其敏感性為56.7％，特