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1、 目的: 體外培養(yǎng)人眼眶成纖維細(xì)胞,以培養(yǎng)的眶成纖維細(xì)胞為研究對象,觀察己酮可可堿(PTX)對眶成纖維細(xì)胞增殖及分泌透明質(zhì)酸(HA)的作用。 方法: 1.組織塊法培養(yǎng)人眶成纖維細(xì)胞,觀察細(xì)胞的生長狀況及特性、HE染色了解其形態(tài)學(xué)特點,免疫組化染色鑒定細(xì)胞來源?! ?.將培養(yǎng)的細(xì)胞以1×103/孔接種于細(xì)胞培養(yǎng)板中,10%胎牛血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)48h,無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)24h后,隨機分組,設(shè)空白對照組及不同濃度(0.001
2、、0.01、0.1、0.5、1mg/ml)PTX組,每組6個復(fù)孔。分別作用24、48、72小時后,觀察細(xì)胞形態(tài)的變化,應(yīng)用MTT比色法、放射免疫分析法觀察不同濃度PTX對眶成纖維細(xì)胞增殖及分泌透明質(zhì)酸的作用。 結(jié)論: 1.本實驗成功培養(yǎng)出眶成纖維細(xì)胞。細(xì)胞傳代穩(wěn)定,為甲狀腺相關(guān)眼病的研究提供了實驗?zāi)P汀! ?.己酮可可堿可以抑制眶成纖維細(xì)胞的增殖及透明質(zhì)酸的分泌,并且具有劑量依賴性和時間依賴性,為己酮可可堿的臨床應(yīng)用提供了
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