尾加壓素Ⅱ?qū)ε囵B(yǎng)的心臟成纖維細(xì)胞增殖和膠原合成的影響.pdf

1、　　目的：人尾加壓素Ⅱ(human Urotensin,hUⅡ)是迄今所知體內(nèi)最強(qiáng)的縮血管活性肽。hUⅡ與其特異受體GPR14廣泛分布于心血管組織中,推測(cè)hUⅡ是又一種神經(jīng)激素調(diào)節(jié)劑參與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展。本課題在以往研究基礎(chǔ)上,觀察hUⅡ?qū)ε囵B(yǎng)的SD乳鼠(Sprague-Dawley,SD)的心臟成纖維細(xì)胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖和膠原合成的直接影響,探討hUⅡ是否以非血流動(dòng)力學(xué)的方式在心肌間質(zhì)重塑中發(fā)

2、揮作用,為其可能參與心力衰竭的病理生理機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：(1) 以胰酶消化和差速貼壁的方法分離和純化SD乳鼠的CFs；(2) 采用四氮唑鹽(MTT)比色法測(cè)定CFs增殖；(3) 應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測(cè)定Ⅰ型膠原(CoL-Ⅰ)mRNA表達(dá)水平；(4) [3]H-脯氨酸摻入的方法檢測(cè)CFs內(nèi)膠原合成速率。
　　結(jié)果：(1) SABC免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示CFs波形蛋白呈陽性反應(yīng),陽性率可達(dá)90%以上

3、。(2) hUⅡ有促進(jìn)體外培養(yǎng)的CFs增殖的作用,隨著hUⅡ作用濃度的增加MTT光吸收值呈先升高后降低的趨勢(shì),其中10-8mol/L和10-9mol/L的hUⅡ作用顯著(P<0.01)；(3) 10-7mol/L~10-9mol/L濃度的hUⅡ均能促進(jìn)體外培養(yǎng)的CFs的Col-Ⅰ mRNA的表達(dá)(P<0.01)；(4) hUⅡ呈濃度依賴的方式增加體外培養(yǎng)的CFs [3]H-脯氨酸摻入速度,10-7mol/L~10-9mol/L的hUⅡ組