睪酮對(duì)血管緊張素II誘導(dǎo)的心肌成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響.pdf

1、背景：
　　心肌重構(gòu)是心臟對(duì)各種刺激產(chǎn)生的適應(yīng)性增生，也是冠心病、高血壓、心力衰竭等多種心臟疾病發(fā)展至終末期的共同病理改變。表現(xiàn)為心肌細(xì)胞肥大、凋亡，心肌成纖維細(xì)胞增殖、膠原增加，基質(zhì)蛋白聚集等。心肌重構(gòu)不僅表現(xiàn)為心臟結(jié)構(gòu)的重構(gòu)，還包括電重構(gòu)。早期重構(gòu)可代償心臟功能，增強(qiáng)心臟的收縮能力，維持心臟正常的射血量，但隨著壓力負(fù)荷、容量負(fù)荷的增加及神經(jīng)體液因素的參與，心肌重構(gòu)逐漸發(fā)展為失代償期，最終導(dǎo)致心力衰竭、心律失常，甚至猝死。心肌重

2、構(gòu)的主要表現(xiàn)是心肌纖維化，心肌纖維化即心肌成纖維細(xì)胞過(guò)度增殖，膠原合成增加等。心肌纖維化可導(dǎo)致心肌僵硬度增加，順應(yīng)性降低，心臟的收縮舒張功能受限，是獨(dú)立的心血管疾病危險(xiǎn)因素。因此，有效的治療心肌纖維化對(duì)冠心病、高血壓、心力衰竭、心律失常等疾病將產(chǎn)生有益的影響。
　　睪酮是人體內(nèi)重要的雄性激素，在維持人體的正常生理功能方面，特別是男性的生長(zhǎng)發(fā)育、性欲、體力、免疫功能等方面發(fā)揮重要作用，還可維持骨密度及強(qiáng)度，另外對(duì)身體的許多系統(tǒng)及功能

3、也會(huì)產(chǎn)生影響，如脂代謝、糖代謝、炎癥反應(yīng)、血細(xì)胞的生成等。生理水平的睪酮對(duì)心血管系統(tǒng)也有保護(hù)作用，如調(diào)節(jié)血脂、減輕動(dòng)脈粥樣硬化、抗炎、擴(kuò)張血管、保護(hù)AngII誘導(dǎo)的血管重塑等。但是人體內(nèi)的睪酮水平，特別是有生物學(xué)效應(yīng)的睪酮隨著年齡的增長(zhǎng)而逐漸下降，睪酮水平的降低嚴(yán)重影響著人體的健康，如肌力下降，性欲減低，情緒障礙，代謝綜合征等，并且心血管系統(tǒng)疾病及呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)也將增加。睪酮藥物替代治療對(duì)男性性腺機(jī)能減退的患者有積極的治療作用，

4、如增強(qiáng)肌力，提高性欲，降低體脂水平，增加體質(zhì)量。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，生理劑量的睪酮藥物可降低心血管疾病的危險(xiǎn)因素，如改善血脂代謝，擴(kuò)張冠脈。而睪酮是否對(duì)心肌纖維化有影響，其具體機(jī)制是什么？國(guó)內(nèi)及國(guó)外學(xué)者卻很少研究到。
　　目的：
　　觀察睪酮(testosterone,T)對(duì)血管緊張素II(angiotensinII,AngII)誘導(dǎo)的新生乳鼠心肌成纖維細(xì)胞(cardiac fibroblasts,CF)增殖和膠原合成的影響，并進(jìn)一步

5、探討其機(jī)制。
　　方法：
　　分離、培養(yǎng)CF，然后將其分為四組：對(duì)照組（無(wú)血清DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)）、AngII組（含10-6mol·L-1AngII的無(wú)血清DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)）、睪酮組（含30nmol·L-1睪酮的無(wú)血清DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)）、睪酮+ AngII組（含30nmol·L-1睪酮和10-6mol·L-1 AngII的無(wú)血清DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)），分別培養(yǎng)24h，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布，VG染色法檢測(cè)膠原含量

6、，免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(p-ERK1/2)的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.AngII組S期細(xì)胞比例、膠原含量和p-ERK1/2表達(dá)水平較對(duì)照組明顯增加；
　　2.睪酮組細(xì)胞周期分布、膠原含量與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而p-ERK1/2表達(dá)較對(duì)照組升高；
　　3.睪酮+ AngII組S期細(xì)胞比例、膠原含量和p-ERK1/2表達(dá)水平較AngII組明顯降低。(S期細(xì)胞比例：FAngII=30.403