bFGF對培養(yǎng)的人心肌成纖維細胞膠原合成的影響.pdf

1、目的 (1)建立體外培養(yǎng)人心肌成纖維細胞(hCFs)的方法，觀察體外培養(yǎng)的hCFs的生物學特性 (2)研究堿性成纖維細胞生長因子(Basic fibroblast growth factor bFGF)對hCFs膠原合成的影響 (3)探討 bFGF對人心肌成纖維細胞膠原合成的影響與心房顫動的相關機制。 方法： 用消化、差速貼壁法原代培養(yǎng)心肌成纖維細胞，2-3代細胞用于實驗，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)

2、，抗纖維連接蛋白抗體免疫細胞化學染色進行細胞鑒定。實驗分為兩組： (1)對照組，未加任何誘導劑培養(yǎng)24小時。 (2)bFGF干預組，分別加入1ng/ml、5ng/ml、10ng/mlbFGF培養(yǎng)24小時。應用逆轉錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)測定Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原mRNA表達水平。 結果: (1)hCFs可在體外成功的培養(yǎng)傳代，體外可連續(xù)傳6-8代。顯微鏡下細胞形態(tài)良好，細胞免疫熒光染色可見細胞漿波形蛋

3、白抗體、α-SMA抗體染色呈陽性，顯紅色，純度大于98％。VWF抗體染色陰性。臺盼藍排斥實驗，細胞存活率達90％以上。 (2)1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml濃度的bFGF均能促進體外培養(yǎng)的hCFs的I型膠原RNA表達水平(P＜0.05)。 結論: 本研究觀察到bFGF能直接促進體外培養(yǎng)的hCFsI型膠原mRNA表達水平的表達，作用的特點呈濃度依賴性。推斷bFGF是獨立于血流動力學之外的又一致心肌纖維化