IL-22對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察IL-22對(duì)體外培養(yǎng)BALB/c小鼠的心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)以及其蛋白表達(dá)變化的影響，旨在探索IL-22對(duì)小鼠心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ表達(dá)的影響。
　　方法：從1周齡BALB/c小鼠心臟中分離培養(yǎng)心肌成纖維細(xì)胞并純化，培養(yǎng)心肌成纖維細(xì)胞并利用第2-4代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。依據(jù)形態(tài)學(xué)以及免疫熒光對(duì)心肌成纖維細(xì)胞內(nèi)波形蛋白標(biāo)記進(jìn)行細(xì)胞鑒定。心肌成纖維細(xì)胞應(yīng)用不同濃度IL-22刺激48h后，提取細(xì)胞的mRNA并逆轉(zhuǎn)錄為cDN

2、A后使用熒光定量PCR檢測(cè)心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原前α鏈(COL1A1)mRNA的表達(dá)變化；使用免疫熒光標(biāo)記心肌成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原蛋白并于熒光顯微鏡下拍照，然后使用軟件對(duì)圖像進(jìn)行分析，以測(cè)量光密度值來(lái)檢測(cè)Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：⑴用1ng/mL IL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞COL1A1mRNA的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)；用100ng/mLIL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞COL1A1 mRNA的

3、表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)；用100ng/mL IL-22以及100μMS3I-201共刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞COL1A1 mRNA的表達(dá)明顯低于單用100ng/mL IL-22刺激組(P＜0.01)。⑵用1ng/mL IL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)明顯低于對(duì)照心肌成纖維細(xì)胞(P＜0.05)；用100ng/mL IL-22刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)；用

4、100ng/mL IL-22以及100μM S3I-201共刺激48小時(shí)后心肌成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白表達(dá)明顯低于單用100ng/mL IL-22刺激組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：IL-22不同的刺激濃度對(duì)體外培養(yǎng)的心肌成纖維細(xì)胞膠原Ⅰ表達(dá)調(diào)節(jié)有差別，低濃度IL-22(1ng/mL)刺激下調(diào)其膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄以及其蛋白表達(dá)，高濃度IL-22(100ng/mL)刺激上調(diào)其膠原Ⅰ的基因轉(zhuǎn)錄以及其蛋白表達(dá)；高濃度IL-22刺激上調(diào)其膠原