癌相關(guān)成纖維細(xì)胞來源的IL-22對胃癌侵襲作用的影響和相關(guān)機制的研究.pdf

1、分類號：R7352密級：學(xué)位類剮：科學(xué)學(xué)位函專業(yè)學(xué)位口0學(xué)校代碼：10062學(xué)號：2011601083學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)又肄簣科^母1‘I矗羹IJl麓鞠基D蜒；址0麓lV暑鷦門愕博士學(xué)位論文DOCTORALDISSERTA汀ION論文題目：癌相關(guān)成纖維細(xì)胞來源的IL22對胃癌侵襲作用的影響和相關(guān)機制的研究TITLEStudyofproinvasivefunctionofcancerassociatedfiborblastsderivedIL

2、22ingastriccanceranditsunderlyingmechanism一級學(xué)科：l播床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科：內(nèi)科學(xué)消化系病論文作者：孫超指導(dǎo)教師：王邦茂教授導(dǎo)師組成員：福井廣一助教天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文中文捅要目的：胃癌(gastriccancer，GC)是最常見的消化道惡性腫瘤之一，其發(fā)病率、死亡率在全世界惡性腫瘤中分別居第四位、第二位，尤其是晚期胃癌，其5年生存率僅為30％40％，這一高死亡

3、率與胃癌具有較強的侵襲和轉(zhuǎn)移能力有關(guān)。近年來的研究認(rèn)為，腫瘤的進(jìn)展和侵襲，除了依靠癌細(xì)胞自身無限增殖的潛能，還取決于與其激活和“利用”周圍間質(zhì)微環(huán)境中各種成分的能力。癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(canerassociatedfibroblasts，CAFs)，是腫瘤微環(huán)境中的重要成員之一，可以分泌多種生長因子、炎癥因子、趨化因子和蛋白酶，這些因子通過旁分泌的作用方式，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長、增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，介導(dǎo)腫瘤微環(huán)境中新生血管的生成，局部炎癥環(huán)

4、境的產(chǎn)生以及細(xì)胞外基質(zhì)的降解和重構(gòu)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)胃癌侵襲前沿的梭型／纖維狀問質(zhì)細(xì)胞中可以表達(dá)IL一22，但是其在胃癌組織中的具體來源、對腫瘤進(jìn)展的影響以及與臨床病理資料之間的關(guān)系尚不明確。因此本研究以IL22為目標(biāo)，首先研究其在胃癌中的表達(dá)、來源以及與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系，然后通過一系列體外實驗闡明IL一22在胃癌進(jìn)展中的生物學(xué)作用及其作用機制，旨在為胃癌的診斷和治療提供新的靶點。方法：(1)收集36例未接受任何手術(shù)前抗腫瘤治療的胃癌

5、患者組織標(biāo)本，免疫組織化學(xué)法檢測1L22和其功能性受體IL22R1的表達(dá)和定位情況；(2)免疫組化檢測IL22下游信號通路蛋白pSTAT3的表達(dá)情況；(3)分析IL22、IL22R1和P—STAT3的表達(dá)與胃癌患者臨床病理資料之間的關(guān)系；(4)逆轉(zhuǎn)錄PCR(reversetranscription—polymerasechainreaction，RTPCR)和Westernblot檢測多種胃癌細(xì)胞系中IL一22受體IL一22RI／IL一

6、10R2的表達(dá)情況；(5)分離和培養(yǎng)原代胃癌CAFs，通過ELISA方法檢測IL一22蛋白的分泌情況；(6)采用WST1方法檢測IL22對胃癌細(xì)胞AGS／MKN28增殖情況的影響；(7)采用臺盼藍(lán)排斥染色法檢測IL22對胃癌細(xì)胞AGS／MKN28存活率的作用：(8)采用8pro孔徑的Transwell小室檢測IL22對胃癌細(xì)胞AGS／MKN28侵襲能力的影響；(9)利用Westernblot檢測IL一22作用下AGS／MKN28細(xì)胞內(nèi)信