脂肪干細(xì)胞來源的生長因子對皮膚成纖維細(xì)胞遷移和增殖的影響.pdf

1、背景:
　　脂肪干細(xì)胞條件培養(yǎng)液(adipose stem cell-conditioned medium,ASC-CM)中富含各類脂肪干細(xì)胞(adipose stem cells,ASCs)來源的細(xì)胞因子。目前研究證實(shí),ASC-CM可以促進(jìn)皮膚創(chuàng)傷修復(fù),皮膚成纖維細(xì)胞是一類幾乎參與整個(gè)創(chuàng)傷修復(fù)過程的重要效應(yīng)細(xì)胞,其遷移與增殖是創(chuàng)傷修復(fù)首要的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
　　目的:
　　研究ASC-CM中表皮生長因子(EGF),血小板源

2、性生長因子(PDGF),血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)在創(chuàng)傷愈合過程中對皮膚成纖維細(xì)胞遷移和增殖的作用機(jī)制。
　　方法:
　　(1)采用蛋白芯片技術(shù),檢測ASC-CM中包括EGF、PDGF、VEGF以及bFGF在內(nèi)的507種細(xì)胞因子的含量(信號值,SV);(2)采用劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell小室遷移實(shí)驗(yàn),在ASC-CM中分別加入0、1、10、20、50、100ng/ml濃度的EGF、PDGF、

3、VEGF和bFGF,上述各因子的中和抗體,及上述單一因子誘導(dǎo)皮膚成纖維細(xì)胞遷移24h后,檢測其遷移率;(3)采用CCK-8實(shí)驗(yàn),誘導(dǎo)皮膚成纖維細(xì)胞增殖3d后,檢測其增殖率,分組同上。
　　結(jié)果:
　　(1)ASC-CM中EGF(SV=458.0)、PDGF(SV=363.5)、VEGF(SV=360.5)、以及bFGF(SV=389.5)信號值均大于300;(2)相較于單一因子,ASC-CM對成纖維細(xì)胞的遷移有明顯的促進(jìn)作用

4、。其中,PDGF、VEGF和bFGF對細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用顯著,且隨著濃度的上升而增加,PDGF在50ng/ml時(shí)、VEGF在20ng/ml時(shí)、bFGF在20ng/ml時(shí)達(dá)到各自的平臺期;在ASC-CM中分別加入PDGF、VEGF和bFGF的中和抗體后,促進(jìn)作用可被明顯抑制;(3)相較于單一因子,ASC-CM對成纖維細(xì)胞的增殖有明顯的促進(jìn)作用。其中,EGF和bFGF對細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用顯著,且隨著濃度的上升而增加,并分別在50ng/ml和

5、20ng/ml時(shí)達(dá)到平臺期;在ASC-CM中分別加入EGF和bFGF的中和抗體后,促進(jìn)作用可被明顯抑制。
　　結(jié)論:
　　相較于單一因子,ASC-CM可明顯促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞的遷移和增殖,其中所含有的PDGF、VEGF和bFGF對細(xì)胞遷移促進(jìn)作用非常明顯,且具有濃度依賴性;EGF和bFGF對細(xì)胞增殖促進(jìn)作用非常明顯,且具有濃度依賴性。因此ASC-CM對皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的促進(jìn)作用優(yōu)于單一因子;同時(shí),在應(yīng)用ASC-CM時(shí)應(yīng)注意選擇適