胃癌相關成纖維細胞影響胃癌細胞對順鉑敏感性的初步研究.pdf

1、胃癌是我國死亡率最高的惡性腫瘤之一，男女人口死亡率遠高于歐美發(fā)達國家?；熓侵委熅植客砥诤娃D移性胃癌的主要方法。然而迄今為止，以5-FU、順鉑和紫杉醇為基礎的各種聯合化療方案的總體有效率只有20-40％，大部分病人遲早會經歷化療失敗。原發(fā)或繼發(fā)性耐藥是導致胃癌化療失敗的主要原因之一。
　　從以往的研究中我們發(fā)現，體外實驗大部分化療藥物可以輕易地誘導胃癌細胞系的凋亡，然而一旦移至體內，藥物療效即“大打折扣”。這一現象提示我們，除了腫

2、瘤細胞自身的耐藥本能以外，機體內復雜的環(huán)境，特別是腫瘤微環(huán)境可能參與了腫瘤的耐藥過程。而作為腫瘤微環(huán)境中一個不可缺少的組成元素，腫瘤相關成纖維細胞（cancer associated fibroblasts，CAFs）與腫瘤的相互作用正在不斷引起人們的注意。在前期實驗中，本課題組將成纖維細胞與胃癌細胞共培養(yǎng)后，發(fā)現順鉑對胃癌細胞的殺傷作用明顯減弱，且當成纖維細胞與腫瘤細胞達到最適比例(1∶1)搭配時，對胃癌細胞的保護最佳。為了更準確的驗

3、證這一現象，我們首先通過術中獲取的胃癌患者新鮮組織（瘤內組織或正常組織），原代培養(yǎng)了數個不同患者來源的成纖維細胞系。通過免疫細胞化學方法，我們對所建成纖維細胞系的特定蛋白（α-SMA、FAP、Vimentin)的表達情況做了鑒定，以區(qū)別胃癌相關成纖維細胞和正常成纖維細胞。隨后，我們通過成纖維細胞-腫瘤細胞相互作用模型（Transwell共培養(yǎng)、條件培養(yǎng)基培養(yǎng)），研究了成纖維細胞對胃癌細胞的生長、運動和耐藥的影響。實驗證明胃癌相關細胞能促

4、進胃癌細胞的生長和運動，并能降低順鉑對胃癌細胞的敏感性。
　　已有研究發(fā)現TGF-β/Smad信號通路是腫瘤-間質相互作用中重要的通路之一。腫瘤細胞和成纖維細胞能夠通過旁分泌TGF-β等細胞因子進行相互作用，最終影響腫瘤的增殖、侵襲和轉移。本課題組所觀察到的胃癌相關成纖維細胞促進胃癌細胞生長、運動和耐藥的現象是否也有TGF-β/Smad通路的參與？有無其他通路參與介導了這一現象的產生？為了闡述相關機制，我們Western-blot

5、、PCR等技術，研究了TGF-β及Smad2在共培養(yǎng)模型中的表達情況。結果表明，TGF-β/Smad2通路參與了胃癌相關成纖維細胞促進胃癌細胞生長、運動和對順鉑耐藥的機制，但TGF-β/Smad2在相應機制中的具體作用仍需要進一步研究。
　　通過上述實驗，我們得出以下結論:
　　1)胃癌相關成纖維細胞具有區(qū)別于正常成纖維細胞的表型，且其生長特性在不同個體及不同組織中具有異質性;
　　2)胃癌相關成纖維細胞能促進胃癌細胞