洛鉑對(duì)人胃癌細(xì)胞株放射敏感性影響的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的:觀察洛鉑(LBP)對(duì)人胃癌細(xì)胞株BGC823和SGC7901放射敏感性的影響，探討可能的機(jī)制。
　　方法：(1)MTT法測(cè)定不同濃度LBP對(duì)人胃癌細(xì)胞株BGC823和SGC790124小時(shí)細(xì)胞增殖抑制率，計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50)，以20％IC50作為增敏濃度；(2)克隆形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定兩株細(xì)胞單純照射組(X射線照射劑量設(shè)為：0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8Gy)和加藥+照射組(LBP增敏濃度+0 Gy、2 Gy、4

2、 Gy、6 Gy、8Gy)細(xì)胞存活率，繪制細(xì)胞存活曲線、計(jì)算放射增敏比(SER)和確定干預(yù)照射劑量；(3)流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測(cè)定兩株細(xì)胞空白對(duì)照組(不照射、不加藥)、單純照射組(干預(yù)劑量X射線)、加藥+照射組(增敏濃度LBP+干預(yù)劑量X射線)的細(xì)胞周期及凋亡率；(4)Western Blotting測(cè)定兩株細(xì)胞空白對(duì)照組、單純照射組、加藥+照射組凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax及cleaved caspase-3表達(dá)水平。
　　結(jié)

3、果：(1)人胃癌細(xì)胞株BGC823和SGC7901增殖抑制率隨LBP濃度升高而升高，呈量一效關(guān)系，兩株細(xì)胞IC50分別為16.08ug/ml和20.66ug/ml，增敏濃度分別選用3.2ug/ml和4.0 ug/ml；(2)兩株細(xì)胞單純照射組、加藥+照射組細(xì)胞存活率隨X射線劑量增加而減小，取4Gy為干預(yù)照射劑量，SER分別為1.13和1.08；(3)兩株細(xì)胞單純對(duì)照組、加藥+照射組細(xì)胞周期分布與空白對(duì)照組相比，加藥+照射組與單純照射組相

4、比，G2/M期比例均升高、S期比例降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。兩株細(xì)胞照射后出現(xiàn)G2/M期阻滯，S期分布比例減少，加入LBP，G2/M期比例進(jìn)一步增加、S期比例減少。兩株細(xì)胞加藥+照射組、單純照射組凋亡率均高于空白對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，加約+照射組細(xì)胞凋亡率較單純放射組升高(P<0.05)；(4)兩株細(xì)胞單純照射組、加約+照射組的蛋白表達(dá)水平與空白對(duì)照組的相比，Bcl-2表達(dá)水平降低，Bax、cleav

5、ed caspase-3表達(dá)水平升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，加藥+照射組與單純照射組相比，Bcl-2表達(dá)水平進(jìn)一步下降，Bax、cleaved caspase-3表達(dá)水平升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。照射后，細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)水平下降，促凋亡蛋白Bax表達(dá)水平升高，激活Caspase-3，其活化產(chǎn)物cleaved caspase-3表達(dá)水平升高，LBP增強(qiáng)下調(diào)Bcl-2和上調(diào)Bax的表達(dá)水平。