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文檔簡介
1、目的:探討RNA干擾survivin基因表達(dá)對肝癌細(xì)胞放射敏感性的影響。
方法:構(gòu)建針對人肝癌HepG2細(xì)胞survivin基因靶序列的shRNA真核表達(dá)載體pshRNA-survivin-387。設(shè)置空白對照組（不加載體）、陰性對照組(加入pshRNA-survivin-NC)及siRNA轉(zhuǎn)染組（加入pshRNA-survivin-387），用脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測各組survi
2、vin基因mRNA表達(dá)水平。分別設(shè)置空白對照組、陰性對照組、siRNA轉(zhuǎn)染組、X線照射組、siRNA+X線照射組，收集各組細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率，MTT法測定細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)。
結(jié)果:siRNA轉(zhuǎn)染組survivin基因mRNA表達(dá)水平明顯低于空白對照組及陰性對照組，差異有顯著性(F=218.93，q=17.73、18.66，P＜0.05)。siRNA轉(zhuǎn)染+X線照射組細(xì)胞凋亡率明顯高于其他各組，差異有顯著性(F=142
3、1.83，q=13.81～57.48，P＜0.05); siRNA轉(zhuǎn)染組及X線照射組與空白組、陰性組比較，細(xì)胞凋亡率也明顯提高(q=17.55～39.1，P＜0.05)。siRNA轉(zhuǎn)染+X線照射組細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)顯著低于其他各組(F=2870.58，q=15.32～72.51，P＜0.05); siRNA轉(zhuǎn)染組及單純X線照射組細(xì)胞存活分?jǐn)?shù)與空白對照組、陰性對照組比較也明顯降低(q=11.14～73.9，P＜0.05)。
結(jié)論:
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