RNA干擾抑制肺腺癌細胞HMGA1表達對放射敏感性的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾（RNAi）抑制高遷移率族蛋白A1（HMGA1）基因表達，觀察肺腺癌細胞株SPCA-1對放射敏感性的影響。
　　 方法：將前期制備的HMGA1siRNA慢病毒載體轉(zhuǎn)染至肺腺癌SPCA-1細胞并分為陽性組（含HMGA1siRNA細胞）、陰性組（含陰性siRNA細胞）及空白對照組（未轉(zhuǎn)染細胞）。采用半定量RT-PCR和Western blotting分別檢測HMGA1 mRNA及蛋白表達情況。細胞克隆

2、形成實驗、多靶單擊模型擬合繪制細胞存活曲線觀察細胞放射敏感性的變化；流式細胞術(shù)檢測各組細胞凋亡率。
　　 結(jié)果：半定量RT-PCR和Western blotting結(jié)果顯示，與陰性組及對照組相比，陽性組細胞HMGA1基因表達量明顯下調(diào)。不同劑量照射后，克隆形成實驗顯示陽性組克隆形成率明顯升高（P<0.05）；細胞存活曲線顯示陽性組細胞D0、Dq、N及SF2分別為：2.36、3.43、4.25、0.91，高于對照組（2.04、1.

3、53、2.13、0.63）及陰性組細胞（2.09、1.58、2.15、0.64）（P<0.05）；流式細胞術(shù)檢測陽性組細胞凋亡率均低于對照組及陰性組（P<0.05）。
　　 結(jié)論：（1）、通過慢病毒介導(dǎo)的RNAi技術(shù)可以成功抑制肺腺癌細胞SPCA-1中HMGA1基因的表達。（2）、HMGA1siRNA特異性下調(diào)SPCA-1細胞中HMGA1基因表達，抑制細胞凋亡，并降低細胞的放射敏感性，提示HMGA1可能是腫瘤細胞放射敏感性的一個

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