肝癌細(xì)胞放射敏感性與Survivin蛋白表達(dá)的關(guān)系.pdf

1、目的：研究兩株肝癌細(xì)胞SMMC-7721和HepG2的放射敏感性差異及丫射線照射后兩細(xì)胞株Survivin蛋白的表達(dá)、Caspase-3的活性及細(xì)胞周期的變化。分析Survivin蛋白表達(dá)與肝癌細(xì)胞放射敏感性之間的關(guān)系及其機(jī)制，為臨床肝癌的放療增敏提供新的靶點(diǎn)及有力的理論依據(jù)。 方法：肝癌細(xì)胞HepG2和SMMC-7721在接受不同劑量Y射線照射后采用克隆形成實(shí)驗(yàn)繪制兩細(xì)胞的劑量存活曲線；用流式細(xì)胞儀分析照射前后細(xì)胞周期的變化；

2、應(yīng)用免疫細(xì)胞學(xué)方法測定照射前后兩細(xì)胞Survivin蛋白的表達(dá)；采用比色法檢測兩細(xì)胞株在照射后72小時(shí)Caspase-3的活性度。 結(jié)果：HepG2的DO、Dq、N值分別為1.57、0.86、1.73；SMMC-7721的DO、Dq、N值分別為1.81、1.72、2.61，HepG2細(xì)胞的放射敏感性高于SMMC-7721細(xì)胞。γ射線可誘導(dǎo)兩株肝癌細(xì)胞發(fā)生G2/M期阻滯，其中SMMC-7721的G2/M期阻滯時(shí)間較HepG2細(xì)胞長

3、(48h vs 24h)，在阻滯峰各劑量點(diǎn)的G2/M期比例也更高。而阻滯解除后SMMC-7721比HepG2有更多比例的細(xì)胞轉(zhuǎn)入下一個(gè)細(xì)胞周期G0/G1期。兩株肝癌細(xì)胞在照射前均表達(dá)Survivin蛋白，且核內(nèi)比胞漿中更強(qiáng)。γ射線可上調(diào)兩株細(xì)胞Survivin蛋白的表達(dá)，在照射后48～72小時(shí)，SMMC-772l細(xì)胞的Survivin蛋白表達(dá)明顯高于HepG2細(xì)胞。在γ射線照射后72小時(shí)，兩肝癌細(xì)胞均有Caspase-3的激活，且其活性

4、均隨照射劑量的增加而增加，HepG2細(xì)胞在各個(gè)劑量點(diǎn)Caspase-3的活化度均高于SMMC-7721細(xì)胞。 結(jié)論：HepG2細(xì)胞的放射敏感性高于SMMC-7721細(xì)胞。照射可誘導(dǎo)兩株細(xì)胞Survivin蛋白表達(dá)上調(diào)，其中SMMC-7721細(xì)胞的Survivin蛋白表達(dá)、G2/M期阻滯均強(qiáng)于強(qiáng)于HepG2細(xì)胞，而Caspase-3的活化度則較弱。Survivin可能通過其周期特異性表達(dá)和對Caspase-3的負(fù)調(diào)控參與肝癌細(xì)胞的