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文檔簡介
1、胃癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一,占惡性腫瘤致死原因的第二位。目前對(duì)于胃癌的治療效果仍不理想,大多數(shù)患者有臨床癥狀時(shí)都已處于晚期并出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。因此,深入理解胃癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制對(duì)于尋找有效的治療手段非常重要。
CD147是一種廣泛分布于細(xì)胞表面的糖蛋白,屬于免疫球蛋白超家族,參與多種生理和病理過程。CD147高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞,通過刺激成纖維細(xì)胞等問質(zhì)細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinase
2、,MMPs)降解細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜而促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。CD147高表達(dá)還能提高腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥性。
本課題利用RNA干擾技術(shù)抑制人胃癌細(xì)胞株SGC7901中CD147的表達(dá),研究對(duì)SGC7901細(xì)胞增殖和侵襲能力及順鉑敏感性的影響,探討將CD147作為胃癌治療的靶分子的可能性。我們構(gòu)建靶向CD147的短發(fā)卡RNA(shRNA)表達(dá)載體并穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至SGC7901細(xì)胞中,通過Real-timePCR和Westemb
3、lot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞中CD147表達(dá)水平的變化;MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞增殖能力的變化;明膠酶譜法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞培養(yǎng)上清中MMP-2和MMP-9活性的變化;Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后腫瘤細(xì)胞侵襲能力的變化;MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物順鉑敏感性的變化。
我們研究發(fā)現(xiàn),靶向CD147的shRNA表達(dá)載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染至SGC7901細(xì)胞后,CD147的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯降低,并能顯著降低SGC7901細(xì)胞
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