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文檔簡介
1、目的:本文研究wortmannin對體外培養(yǎng)的SGC 7901人胃癌細胞系的抗瘤作用,并初步探討其作用機制。
方法:以SGC 7901人胃癌細胞為研究對象,將實驗對象分為對照組、6.25nmol/Lwortmannin組、12.5nmol/L wortmannin組,處理24 h 后用相差顯微鏡觀察各組SGC7901細胞在大小、形態(tài)及生長方式上的改變;將實驗對象分為空白對照組、DMSO對照組、6.25nmol/L wort
2、mannin組、12.5nmol/L wortmannin組、25nmol/L wortmannin組、50 nmol/L wortmannin組。分別在藥物干預后24 h、48 h、72 h,用MTT法連續(xù)檢測各組SGC 7901細胞的增殖抑制率;將實驗對象分為對照組、6.25nmol/Lwortmannin組、12.5nmol/L wortmannin組,用免疫組化法檢測各組Cyclin H、CyclinE、Cyclin D1 以及
3、Bcl-2、Bcl-xL蛋白的表達。
結果:對照組SGC 7901細胞大小形態(tài)不一,疊加成堆生長,喪失接觸抑制和密度抑制,細胞增殖明顯。當分別用6.25nmol/L、12.5nmol/L的wortmannin處理SGC 7901細胞24 h時后,細胞出現(xiàn)明顯的形態(tài)學改變,表現(xiàn)為細胞皺縮、僵化,形態(tài)不規(guī)則,折光增強、貼壁細胞出現(xiàn)漂浮,隨作用時間延長,漂浮細胞數(shù)量增多。與對照組相比,細胞增殖受到明顯抑制,細胞數(shù)量隨著時間和藥物
4、濃度的增加而下降;
MTT實驗顯示,SGC 7901細胞在不同濃度wortmannin 干預下,隨著藥物作用時間的延長,藥物濃度的增加,SGC 7901細胞增殖抑制率進行性增加,各干預組與DMSO對照組的增殖抑制率比較有顯著的差異性(P<0.05),其抑制SGC 7901細胞生長具有時間、濃度依賴性;免疫組化實驗顯示,在不同濃度wortmannin 干預24 h后,SGC 7901細胞中Cyclin H、Cyclin E、
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