

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:失控性體外增殖、遷移和侵襲能力是腫瘤細(xì)胞的基本生物學(xué)特性,這與基因的異常表達(dá)有著密切的關(guān)系。前期的研究結(jié)果顯示,Rab27A基因在胃癌及癌旁正常組織中呈現(xiàn)差異性表達(dá),并且其表達(dá)水平與患者臨床病理學(xué)特征及預(yù)后有明確的相關(guān)性。這就提示Rab27A基因很可能在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。但是,Rab27A基因?qū)ξ赴┘?xì)胞惡性生物學(xué)特性的影響還有待深入研究。目的:研究干擾Rab27A基因?qū)ξ赴┘?xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響。
2、方法:應(yīng)用Western Blot技術(shù)驗(yàn)證Rab27A基因在8對胃癌及癌旁組織中的差異性表達(dá)。采用RT-PCR和Western Blot技術(shù)檢測5個(gè)胃癌細(xì)胞系及1個(gè)永生化細(xì)胞系中Rab27A基因的表達(dá)水平,并從中篩選Rab27A高表達(dá)細(xì)胞株;以高表達(dá)Rab27A基因的SGC7901細(xì)胞為研究模型,通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染,G418篩選,獲得候選RNA干擾穩(wěn)定細(xì)胞株,并通過RT-PCR,Western blot及免疫熒光標(biāo)記等技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證;再經(jīng)過MT
3、T實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)觀察干擾Rab27A后SGC7901細(xì)胞增殖,遷移及侵襲等生物學(xué)行為的改變。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與癌旁正常組織相比,Rab27A基因在胃癌組織中呈現(xiàn)低表達(dá)(7/8,87.5%);在5個(gè)胃癌細(xì)胞系和1個(gè)永生化細(xì)胞系中Rab27A基因呈現(xiàn)差異性表達(dá)。選擇高表達(dá)Rab27A基因的SGC7901細(xì)胞為研究模型,轉(zhuǎn)染RNAi-2/3干擾質(zhì)粒抑制SGC7901細(xì)胞中Ra
4、b27A mRNA和蛋白的表達(dá)。Rab27A干擾穩(wěn)定細(xì)胞株干擾效率鑒定結(jié)果:與Vector相比,RNAi-2/3表達(dá)量明顯下降。MTT實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)和軟瓊脂集落形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,干擾Rab27A對胃癌細(xì)胞SGC7901的細(xì)胞生長曲線、克隆形成數(shù)量及克隆形成大小沒有顯著影響(P>0.05)。Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,干擾Rab27A表達(dá)后的細(xì)胞穿過基膜或基質(zhì)膠的數(shù)量明顯增多(P<0.05),細(xì)胞的遷移和侵襲能力顯著提高。
5、r> 結(jié)論:綜上所述,Rab27A在5個(gè)胃癌細(xì)胞系及1個(gè)永生化細(xì)胞系中呈現(xiàn)差異性表達(dá);Rab27A基因?qū)ξ赴┘?xì)胞的生物學(xué)特性有重要影響,其干擾后可以增強(qiáng)胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力,卻不影響胃癌細(xì)胞的增殖能力。這也提示在胃癌中Rab27A很可能是一種抑癌基因,可以作為潛在的腫瘤預(yù)后標(biāo)記物,為今后的臨床診斷治療及預(yù)后提供重要的參考價(jià)值。至今為止,人們對于腫瘤的認(rèn)識非常有限,更多的基因、效應(yīng)因子、信號通路以及分子機(jī)制仍需被發(fā)現(xiàn)。這不僅可以提升
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- Rab27A基因異常對肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf
- 14-3-3ε對胃癌細(xì)胞系SGC7901生物學(xué)行為的影響.pdf
- mir-216a對胃癌細(xì)胞SGC7901生物學(xué)行為的影響及其相關(guān)機(jī)制.pdf
- EB病毒BARF1基因表達(dá)對胃癌細(xì)胞系SGC7901生物學(xué)行為的影響.pdf
- 多巴酚丁胺對胃癌細(xì)胞株SGC--7901生物學(xué)行為的影響.pdf
- ARK5基因沉默聯(lián)合5-氟尿嘧啶對胃癌細(xì)胞SGC7901生物學(xué)行為的影響.pdf
- GKLF基因?qū)θ宋赴┘?xì)胞株SGC-7901生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- HDAC6基因上調(diào)表達(dá)對胃癌細(xì)胞株SGC-7901生物學(xué)行為的影響.pdf
- MiR-200a和miR-141對人胃癌細(xì)胞株SGC7901生物學(xué)行為的影響及機(jī)制的研究.pdf
- NHE1基因調(diào)控細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡對SGC-7901胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf
- Wortmannin對人胃癌細(xì)胞SGC7901的影響及其機(jī)制研究.pdf
- 短發(fā)夾RNA沉默血紅素氧合酶-1基因表達(dá)對胃癌細(xì)胞系SGC-7901生物學(xué)行為的影響.pdf
- 回轉(zhuǎn)器模擬失重對sgc7901和hfe145細(xì)胞形態(tài)和生物學(xué)行為的影響
- RNA干擾在人胃癌細(xì)胞SGC7901中抑制survivin基因的體外實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 胃泌素對胃癌細(xì)胞SGC7901 RegⅠ基因轉(zhuǎn)錄因子的效應(yīng).pdf
- miR-214對胃癌細(xì)胞SGC7901侵襲遷移能力的影響.pdf
- 二氯化鈷對胃癌細(xì)胞SGC7901凋亡和增殖的影響.pdf
- DRAM基因?qū)ξ赴㏒GC7901細(xì)胞增殖、凋亡和自噬的影響.pdf
- RASSF1A基因抑制胃癌細(xì)胞SGC7901生長及其機(jī)制研究.pdf
- 食欲素A對人胃癌SGC7901細(xì)胞生長的影響.pdf
評論
0/150
提交評論