RUNX3基因?qū)ξ赴┘?xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制.pdf

1、目的： 研究RUNX3與胃癌侵襲、轉(zhuǎn)移、凋亡、耐藥等基因的關(guān)系，探討RUNX3對胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，旨在揭示RUNX3與胃癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為胃癌的診斷、治療提供新的思路。 方法： 選擇73例胃癌患者為研究對象，采用Sp法檢測RUNX3、VEGF-c、Endostatin、cd34、E-cad、MMP-7、TIMP-1、mtP53和MRP1蛋白表達(dá)。分別克隆RUNX3基因的兩個轉(zhuǎn)錄變異體RUNX3a和RU

2、NX3b，構(gòu)建pAdEasy-1-RUNX3a、pAdEasy-1-RUNX3b兩個重組腺病毒表達(dá)載體。并檢測pAdEasy-1-RUNX3a、pAdEasy-1-RUNX3b感染后，胃癌細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和侵襲能力的變化以及RUNX3、VEGF-C、Endostatin、E-cad、MMP-7、TIMP-1、mtP53和MRP1mRNA的表達(dá)。 結(jié)果： (1)RUNX3蛋白陽性組VEGF-C蛋白的陽性率為24.32％，

3、RUNX3蛋白陰性組VEGF-C蛋白的陽性率為50.00％，差異顯著(P＜0.05)。RUNX3蛋白陽性組Endostain蛋白的陽性率為59.46％，RUNX3蛋白陰性組Endostain蛋白的陽性率為27.78％，差異顯著(P＜0.05)。RUNX3蛋白陽性組CD34蛋白陽性微血管密度為36.00±12.02，RUNX3蛋白陰性組CD34蛋白陽性微血管密度為44.06±19.42，差異顯著(P＜0.05)。 (2)RUNX3

4、蛋白陽性組E-Cad蛋白的陽性率為67.57％，RUNX3蛋白陰性組E-Cad蛋白的陽性率為44.44％，差異顯著(P＜0.05)。RUNX3蛋白陽性組MMP7蛋白的陽性率為29.73％，RUNX3蛋白陰性組MMP7蛋白的陽性率為55.56％，差異顯著(P＜0.05)。RUNX3蛋白陽性組TIMP1蛋白的陽性率為67.57％，RUNX3蛋白陰性組TIMP1蛋白的陽性率為38.89％，差異顯著(P＜0.05)。 (3)RUNX3蛋

5、白陽性組mtP53蛋白的陽性率為29.73％，RUNX3蛋白陰性組mtP53蛋白的陽性率為58.33％，差異顯著(P＜0.05)。RUNX3蛋白陽性組MRP1蛋白的陽性率為24.32％，RUNX3蛋白陰性組MRP1蛋白的陽性率為47.22％，差異顯著(P＜0.05)。 (4)成功克隆RUNX3兩個轉(zhuǎn)錄變異體cDNA并分別命名為RUNX3a和RUNX3b，并構(gòu)建了pAdEasy-1-RUNX3a、pAdEasy-1-RUNX3b兩

6、個重組腺病毒載體。 (5)pAdEasy-1-RUNX3a組細(xì)胞和pAdEasy-1-RUNX3b組細(xì)胞與MKN28細(xì)胞和pAdEasy-1組細(xì)胞相比，增殖速度明顯減慢。pAdEasy-1-RUNX3a、pAdEasy-1-RUNX3b組PI值分別明顯低于MKN28、pAdEasy-1組。pAdEasy-1-RUNX3a和pAdEasy-1-RUNX3b組細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)較MKN28細(xì)胞和pAdEasy-1組顯著降低(83.1±9

7、.7，87.6±10.4vs192.8±9.7，193.6±9.3，p＜0.05)。 (6)RUNX3可導(dǎo)致胃癌細(xì)胞VEGF-CmRNA表達(dá)水平明顯下降，EndostatinmRNA表達(dá)水平明顯上調(diào)。 (7)RUNX3可導(dǎo)致胃癌細(xì)胞E-cadherin、TIMP-1mRNA表達(dá)水平明顯上調(diào)，MMP7mRNA表達(dá)水平明顯下降。 (8)RUNX3可導(dǎo)致胃癌細(xì)胞突變型p53和MRP1mRNA表達(dá)水平明顯下降。