短發(fā)夾RNA沉默血紅素氧合酶-1基因表達對胃癌細胞系SGC-7901生物學行為的影響.pdf

1、目的：胃癌是我國最常見的消化道惡性腫瘤之一，且有上升的趨勢，嚴重危害了廣大人民群眾的健康。傳統(tǒng)的外科手術與化療均有各自的局限性，導致胃癌臨床治療效果不滿意，所以研究胃癌發(fā)生、發(fā)展的分子機制及尋求臨床治療的分子靶點成為當前人們普遍關注和迫切需要解決的問題。血紅素氧合酶—1（heme oxygenase—1，HO—1），又稱熱休克蛋白32（hot shock protein32，HSP32），是將血循環(huán)中衰老的紅細胞及血紅蛋白釋出的血紅素分

2、解為鐵離子、膽綠素（biliverdin）與一氧化碳（carbon monoxide，CO）三種產(chǎn)物的起始酶和關鍵酶。此三種產(chǎn)物是HO—1發(fā)揮抗炎、抗氧化、抗凋亡功能的主要效應分子。本研究觀察血紅素氧合酶—1（HO—1）基因沉默對胃癌細胞系SGC—7901生長、增殖的影響。 方法：構建靶向HO—1的短發(fā)夾RNA（shRNA—HO—1）干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胃癌細胞系SGC—7901，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（RT—PCR）、細胞免疫化學分別在

3、mRNA、蛋白質(zhì)水平檢測抑制效果。流式細胞儀和噻唑藍（MTT）檢測HO—1基因沉默后細胞的細胞周期和生長情況。實驗結果用SAS9.13統(tǒng)計軟件分析。 結果：shRNA—HO—1在mRNA、蛋白質(zhì)水平高效特異地抑制了細胞SGC—7901中HO—1的表達（抑制率分別為62.4%、67.6%）；較對照質(zhì)粒組，HO—1的表達被抑制后，G0/G1期細胞百分比明顯減少（52.025±1.638vs67.525±1.938，P<0.05），細